输血相容性检测培训课件.ppt

输血相容性检测内容提要红细胞抗原抗体检测技术盐水介质凝集试验方法：玻片法-便于显微镜观察结果
试管法-适用于不同温度、便于洗涤
反应温度：4～22℃
临床意义：盐水凝集试验阳性，并在37℃也有活性的抗体有意义。室温有活性，37℃无活性者临床意义不大。
优点：简便、快捷、直观。
缺点：不能发现不完全抗体。抗人球蛋白试验是1945年由Coombs等人建立的，又称Coombs试验。抗人球蛋白试验的建立在血型血清学上有着非常重要的意义。

分为直接抗人球蛋白试验（DAT）和间接抗人球蛋白试验（IAT）。IgG类血型抗体（主要是免疫抗体，如Rh血型抗体）分子量小，与红细胞相应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见的凝集反应，称之为不完全抗体，但在加入抗-IgG后，以其搭桥作用则可出现凝集反应。
补体成分在体内被红细胞抗原抗体复合物激活以后，结合在红细胞表面。在体外含补体的多克隆抗体，或抗C3b、抗C3d等单特异性抗体与补体致敏的红细胞反应，使之凝集也称为抗球蛋白试验。DAT是检测体内致敏红细胞的一种方法，用于检查红细胞是否已被不完全抗体所致敏，尤其是IgG和C3d包被的红细胞。
应用：
HDN和自身免疫性溶血性贫血的诊断
红细胞被药物抗体致敏的检查
急性和迟发性溶血性输血反应的检查IAT是检测血清中不完全抗体的一种，用于测定在体外能引起红细胞致敏的抗体。
应用：
血型的鉴定，如Rh血型
抗体的检出和鉴定
交叉配血原理：红细胞表面有丰富的唾液酸，带有负电荷，是红细胞相互排斥的原理。蛋白水解酶能消化破坏这种唾液酸，减少红细胞表面的负电荷以及红细胞之间的排斥力，缩短了红细胞之间的间距，使IgG抗体分子能与有相应抗原的红细胞产生凝集

常用的酶（0.5%）：菠萝酶、木瓜酶、胰酶、无花果酶优点：
酶法能显著增强一些抗原抗体系统的反应活性，Rh和Kidd系统最明显
缺点：
①酶法处理RBC，蛋白酶会使RBC的抗原结构破坏和变性（M、N、Fya、Fyb）
②操作繁复，少数人对酶液过敏原理：
凝聚胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，并借助正负电荷的作用，引起红细胞的非特异性凝集。
当红细胞与血清在低离子介质中孵育后，IgG抗体与红细胞上相应的抗原结合在凝聚胺的作用下发生凝聚。凝集和凝聚在表面上不能区分，再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与凝聚胺上的正电荷中和，非特异性凝集现象消失，而真正的凝集不会消失。微柱凝胶试验微柱凝胶免疫反应的本质：凝集反应微柱凝胶试验几种方法的比较抗体的筛选及鉴定结果的判读与解释抗体鉴定抗体鉴定交叉配血缗钱状凝集抗筛和配血结果分析抗筛和配血结果分析抗筛和配血结果分析抗筛和配血结果分析抗筛和配血结果分析案例分析案例分析欢迎各位领导和同事指正批评！