土壤中分解尿素纤维素的细菌的分离与计数培训课件.ppt

土壤中分解尿素纤维素的细菌的分离与计数[该去哪里取样?]15.0g1.利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物①只是一种细菌吗？②都是能分解尿素的微生物吗？以尿素为
唯一氮源
的培养基如何统计每克土壤样品中
究竟含有多少这样的细菌？1.显微镜直接计数法：这种方法是利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。此法的缺点是不能区分死菌和活菌。2.间接计数法（活菌计数法）
⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。

⑵常用方法：稀释涂布平板法。每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M
其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。某同学在稀释倍数为106的培养基中测得
平板上菌落数的平均数为234，那么每克样
品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液
的体积为0.1ml）()
A.2.34×108
B.2.34×109
C.234
D.23.4稀释涂布平板注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。
②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的培养皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。
③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。如果106稀释度下的三个重复组菌落数分别为1个、50个、170个。应如何处理这个稀释组的数据？106A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验实验设计[一]土壤取样◆应在火焰旁称取土壤10g。
◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行（五）微生物的培养与观察某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿＿培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于＿＿＿＿。在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最激烈的时期是
A．调整期B．对数期
C．稳定期D．衰亡期1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是（）
A.在液体培养基上进行B.至少接种一种细菌
C.接种一个细菌D.及时补充消耗的营养物质
2.使用选择培养基的目的是（）
A.培养细菌
B.培养真菌
C.使需要的微生物大量繁殖
D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别
3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()
A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3
C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素4.下列说法不正确的是（）
A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶
B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度
D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。常见选择培养的方法课题3
分解纤维素的微生物的分离是自然界中纤维素含量最高的天然产物。292.纤维素分解菌的筛选刚果红能与哪项物质形成红色复合物
A．纤维二糖B．纤维素
C．葡萄糖D．麦芽糖1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是土壤取样选择培养二、实验操作使用刚果红染色法时，加入刚果红的时机是：
①制备培养基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤培养基上长出菌落时

A．①③B．②⑤
C．③⑤D．④⑤练一练2.从土壤中分离获得某种微生物的步骤是
①土壤取样②梯度稀释③选择培养④菌悬液涂布平板⑤挑选出单个菌落
A.①②③④⑤B.①③②④⑤
C.①②④③⑤D.①④②③⑤3.有关选择培养正确的叙述是【练一练】
有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和作用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功的筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。
(1)培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供________，这种培养基属于________培养基。
(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入________。(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。为获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是________，操作时采用________灭菌的方法；还可用________的方法接种。
(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉