饲料中氨基酸的测定培训课件.ppt

饲料中氨基酸的测定6饲料中氨基酸的测定(教材P106)6饲料中氨基酸的测定6饲料中氨基酸的测定饲料中氨基酸的测定(教材P120-131)L-8900氨基酸自动分析仪的内部结构饲料中氨基酸的测定饲料中氨基酸的测定RA+B＋RB＋A+(RA是阳离子交换剂，B为溶液中的离子或待分离的生物分子）Ion-exchangechromatography（一）测定原理
B、氨基酸的分离（离子交换树脂分离）
氨基酸：两性电解质，不同氨基酸电离常数各不相同。pH、pI氨基酸pH2.2的条件下都带正电荷，在阳离子交换树脂上均在被吸附，但结合强度各不相同。

随着缓冲液在离子交换柱上流动，氨基酸不断地吸附、解吸附，由于氨基酸性质的差异（酸碱性、极性、分子大小）吸附强度有差异。

不同氨基酸与离子交换树脂的亲和力不同：碱性氨基酸>芳香族氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸及羟基氨基酸。

提高流动相pH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基酸。

氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序一定，标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定，由此可计算出样品中各种氨基酸的含量。饲料中氨基酸的测定分离后的氨基酸与茚三酮试剂在高温反应器中进行衍生反应，生成可以被分光光度计检测的有色物质，然后在检测器中被检测出来。饲料中氨基酸的测定饲料中氨基酸的测定饲料中氨基酸的测定饲料中氨基酸的测定饲料中氨基酸的测定Back1