Westernblot实验技术培训课件-豆柴文库

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Westernblot实验技术定义：WesternBlot基本原理WesternBlot一般流程蛋白样品的制备裂解液SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺
SDS
配胶的Tris缓冲液
TEMED
过硫酸铵(时间)
Tris-甘氨酸电泳缓冲液
凝胶浓度与蛋白分离范围10安装玻璃板12转膜不能有气泡
不要污染膜的表面
注意正负极
冰浴冷却半干转封闭一抗、二抗孵育二抗与底物反应显色WesternBlot常见问题分析SDS-PAGE电泳条带比正常的窄？

“微笑”或“倒微笑”条带？转膜及抗体检测背景太高没有阳性条带或比较弱弥散性条带或非特异性条带EnjoyExperiment,EnjoyLife