蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测酶抑制率法分光光度法培训课件.ppt

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测酶抑制率法分光光度法吸光光度法:基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法,包括目测比色法和分光光度法。
不同物质由于结构不同,所吸收光的波长及吸收程度不同,这就是物质对光的选择性吸收
当一束强度为I0的平行单色光通过一均匀的吸收介质时，由于吸光物质分子与光子的作用，一部分光子被吸收，一部分光子透过介质。设透过的光强度为It，则透光率T定义为T=It/I0，而－lgT称为吸光度A，即
Ａ＝－lgT=lgI0/It测量某物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长（）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制吸光度随波长的变化可得一曲线，此曲线即为吸收光谱。
不同浓度的同一物质，它的最大吸收波长是不变的，但吸光度随浓度增大而增大。
在最大吸收波长处测量吸光度，其灵敏度最高。有色溶液对某一波长光吸收的强度与有色物质的浓度c及吸光溶液的液层厚度b成正比，称为光吸收定律或朗伯－比尔定律，其数学表达式为
A=εbc光电比色法

试剂
pH8.0缓冲溶液分别取11.9g无水磷酸氢二钾与３.２g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。

显色剂分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。
试剂

底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。

乙酰胆碱酯酶根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3min的吸光度变化ΔA0值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用。分析步骤结果计算结果判定酶抑制率法对部分农药的检出限说明THANKYOU