植物胚胎培养.pptx

会计学植物胚胎结构一、胚胎培养概念胚电镜扫描图片双子叶植物胚3、胚乳培养
指处于细胞期的胚乳组织的离体培养。不同植物的胚珠形态结构倒生胚珠
5、子房培养
指授粉和未授粉的子房培养。它对于研究果实发育的生理、离体受精等有重要意义。

6、试管受精
指在无菌条件下培养离体的未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌发产生的花粉进入胚珠而完成受精过程。二、胚胎培养的应用指在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。植物胚结构胚电镜扫描图片双子叶植物胚图示为胚珠和胚囊的发育过程幼胚培养

成熟胚培养（一）幼胚培养
幼胚完全是异养的，离体条件下培养要求培养基成分复杂，培养不易成功。

幼胚培养的关键技术：
取材时期
幼胚剥离
培养条件的控制（是否需要特殊处理）幼胚培养时，其发育过程有以下几种发育方式：
a、胚性发育，此种方式不能萌发成苗
b、早熟萌发，长成的苗十分瘦弱
c、产生愈伤组织，再由愈伤组织分化形成胚或不定芽(1)、胚性发育(embryonaldevelopment)幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚(有时甚至可能类似种子)，然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株，这种途径发育的幼胚一般一个幼胚将来就是一个植株。
(2)、早熟萌发(earlymaturesprouting)幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，通常称之为早熟萌发。在大多数情况下，一个幼胚萌发成一个植株，但有时会由于细胞分裂产生大量的胚性细胞，以后形成许多胚状体，从而可以形成许多植株，这种现象就是所谓的丛生胚现象。
(3)、愈伤组织(callus)在许多情况下，幼胚在离体培养中首先发生细胞增殖，形成愈伤组织。一般来讲由胚形成的愈伤组织大多为胚性愈伤组织，这种胚性愈伤组织很容易分化形成植株。
（二）成熟胚培养
成熟胚是自养的，培养基需要简单。主要目的:
◆研究胚发育过程的形态建成
◆生长调节物质的作用
◆胚与胚乳相互关系和营养要求培养方法：
A、将受精后成熟或未成熟种子或果实，用70%—75%酒精表面消毒消毒几分钟
B、用0.1%升汞溶液或饱和漂白粉溶液消毒10min，无菌水反复冲洗
C、无菌操作台上，直接或在解剖镜下剥取胚接种在培养基上
胚龄胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的3倍体组织。由它可获得无子结实的3倍体植株，进而可将它加倍成6倍体植株。

不同胚乳发育类型及发育时期直接影响外植体取材时期以及胚乳细胞产生愈伤组织频率。

胚乳培养的后代，常发生细胞染色体数目变化，形成多倍体、非整倍体等。1、核型胚乳◆被子植物中普遍的胚乳发育形式
◆初生胚乳核的第一次分裂和以后的多次分裂，都不伴随壁的形成
◆各个胚乳核呈游离状态分布在胚囊中
◆发育到一定阶段后，常在胚囊外围的胚乳核之间出现细胞壁◆为单子叶植物和具有离瓣花的双子叶植物中普遍存在，如小麦、水稻、玉米、棉花、油菜、苹果等/2、细胞型胚乳特点：
◆初生胚乳核的分裂开始，即产生细胞壁，形成胚乳细胞
◆无游离核时期

大多数双子叶合瓣花植物是这样的胚乳，如番茄、烟草、芝麻等。/3、沼生目型胚乳
◆核型胚乳与细胞型胚乳的中间类型
◆初生胚乳核的第一次分裂将胚囊分隔为两室，其中珠孔端室比合点端室宽大
◆核进行分裂形成状态的游离核，最后形成细胞/（二）胚乳培养的关键★旺盛期胚乳特征
§胚已分化完成
§胚乳已形成细胞组织
§充分生长，达到成熟大小
§外观为半透明的固体状
§富有弹性水稻：授粉后4d黑麦草：授粉后8~10d
黄瓜：授粉后7~16d梨：授粉后20d
大麦：授粉后10~20d玉米和小麦：授粉后8~12dB、培养基和激素的影响
培养基：MS、B5、MT、White、LS等
水解酪蛋白、酵母提取物也很必要

激素：要求特殊
大麦胚乳只有在添加2，4-D的培养基上才能生长
猕猴桃胚乳培养中，玉米素最好
枣的胚乳培养中，激素似乎无特殊要求C、其他因素的影响

蔗糖浓度：3%~5%
温度：25℃
pH值：如玉米6.1~7.0；苹果等
（三）培养方法：
A、取授粉4-8d后的幼果，常规消毒
B、无菌条件下切开果实，取出种子，分离出胚乳
C、接种在培养基上，在25-27℃和黑暗条件或散射光下培养形成愈伤组织
D、转到分化培养基上，待愈伤组织长出芽后，切下不定芽
E、插入生根培养基中，光下培养10-15d，切口处长出白色的不定根※两种植物胚乳培养的方法
A、枸杞B、葡萄未授粉胚珠和子房培养是离体受精的基础，可诱发大孢子发育成单倍体植株，且孤雌产生的单倍体植株获得率较孤雄生殖高。

胚珠培养中，已授粉具有球形胚或更后期的胚珠易培养成种子，且培养基及添加成分相对要求不高。而受精不久的胚珠则需要成分复杂的培养基，培养难度大。
1、胚珠培养的意义
有