出口巧克力制品中可可酯的检测方法（编制说明）.doc

《出口巧克力制品中可可酯的测定方法》编制说明
任务来源
现行巧克力制品的相关国家标准规定了可可脂的含量标示要求，但却没有对应的检测方法标准，本项目的实施将有效解决巧克力制品质量安全指标合格评定检测中存在的检测方法标准缺失的问题。我国每年都有各式各样的洋品牌巧克力制品进口到国内、国内也有众多的生产厂商，可可脂是巧克力制品国家标准中规定的重要质量评价指标，但现无适宜的配套检测方法标准，我国对巧克力制品的食品安全管理方面还存在监管的盲区，难于及时发现假冒伪劣产品。为此国家认监委下达了2011B150《出口巧克力制品中可可酯的测定方法》制标计划，由云南出入境检验检疫局承担这一制标任务。
标准研究情况
国内外标准的检测方法
目前国际（欧盟）标准中只有对可可脂的定性鉴定方法标准，其是对可可酯的脂肪酸组成进行测定来鉴定可可脂的纯度，但还未有定量方法标准。
可可酯的性质
可可酯来自于热带植物Theobromacacao,其甘油三酸酯中的脂肪酸组成主要是棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸，目前经鉴定共有8种形式的三甘酯，其中90%是下列四种类型：SSM及SMS（S为饱和酸；M为顺式单不饱和酸；D为顺式二不不饱和酸）并且主要的甘油酯是油酸在2位、棕榈酸及硬脂酸在1，3位。本方法制定了测定1，2，3-甘油-棕榈酸油酸硬脂酸三酯的检测方法。
方法测定原理
试样经二氯甲烷均质提取、氨基固相萃取小柱净化，甲醇洗脱，用液相色谱-质谱/质谱仪检测，外标法定量。
4、测定
液相色谱参考条件
a)色谱柱：HILIC，5μm，150mm×4.6mm（i.d.），或相当者；
b)柱温：35℃；
c)流速：0.30mL/min；
d)进样量：10μL。
e)流动相：甲醇-水，梯度洗脱，流动相梯度条件见表1。
表1流动相梯度条件
时间（min）甲醇（%）水（%）0.0080200.5080202.0095513.0095513.10802016.008020
液相-质谱/质谱法质谱参考条件
电离方式：ESI+；
DP电压：63；EP：6；CXP：8；
离子源温度：500℃；
去溶剂气流氮气：GS1：40ml/min,GS2：40ml/min.气帘气：20ml/min
检测方式：多反应监测（MRM），见表A.1。
表A.1液相色谱-质谱/质谱多反应监测条件
母离子（m/z）子离子（m/z)驻留时间/s碰撞能量/eV880．25790.20033606*0.20036注：表A.1中带*的离子为定量离子。
样品测试情况