超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析β-受体激动剂类兽药残留量检测方法.pdf

超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析β-受体激动剂类兽药残留

量检测方法

李建中，宋越

三重串联四极杆质谱是复杂基质中痕量组分定量分析的重要手段，通过多重反应监控模式
（MRM）能够提供高选择性和高灵敏度的检测。建立在亚二微米粒径填料基础上的超高效快速液相
色谱（RRLC）已得到广泛的应用，和QQQ联用能够提供高通量和高灵敏度的分离分析。本文运用
UHPLC-QQQ对动物源性食品中的14种β-受体激动剂进行定量分析，通过对重复性、线形关系和
回收率等方法学参数进行考察，所建立的方法能在8.0分钟内对14种目标化合物完成快速、高灵敏
度的检测分析，同时采用同位素内标法进行定量测定。本方法采用Agilent6460QQQ系统，利用Jet
Stream鞘流气技术大大提高了去溶剂效果，同时减少了喷雾造成的离子扩散损失，显著的提高了离
子化效率，从而大大提高了灵敏度。本方法采用Agilent特有动态多反应监测（DynamicMRM）模
式对多残留化合物进行监测，实现了自动最大化分配驻留时间(Dwelltime)的功能，兼顾了灵敏度及
采样点数，实现了有机完美的统一，有效简化了方法的开发。本方法完全满足了国内外对β-受体激
动剂类药物日益严格的残留限量监测要求。

1实验部分

1.1仪器与试剂
美国安捷伦公司6460QQQ质谱仪；美国安捷伦公司1260UHPLC。

1.2液相和质谱条件

液相色谱柱为安捷伦ZobaxSB-C18（2.1x100mm,1.8um）；流动相A为水（含0.1%体积比的
甲酸+2mM乙酸铵），B为乙腈（含0.1%体积比的甲酸），梯度（B%/min）：2/0，2/0.5，25/4.0，80/5.0，
90/5.5，2/5.7，2/8.0；柱温45oC；进样量5µL，流速为0.4mL/min。
QQQ质谱参数（ESI+模式）：干燥气温度（GasTemp）325oC，干燥气流量（GasFlow）5mL/min，
雾化器压力（Nebulizer）45psi，鞘流气温度（SheathGasTemp）400oC，鞘流气流量（SheathGasFlow）
12mL/min，毛细管电压（Capillary）3500V，MRM参数见表1，安捷伦MassHunter软件用于定性
（Qualitative）和定量（Quantitative）分析。

2结果与讨论
图1为14种β-受体激动剂的MRM叠加谱图。本文对MS和LC条件进行优化，对线形关系
（R均大于0.99）、检测限（LOQ均低于0.05ng/mL）、峰面积重复性（RSD<6.0%,n=10）等方法
学进行了考察（见表2）。所建立的RRLC-QQQ能够对14种β-受体激动剂进行高灵敏度和高通量
的定量分析。

1

表1.14种β-受体激动剂DMRM参数

CompoundPrecursorMS1ProductMS2CollisionRetTimeDeltaRet
ISTDFragmentor
NameIonResIonResEnergy(min)Time

Salmeterol416.3Unit398.4Unit130106.0621

Salmeterol416.3Unit380.3Unit130176.0621

Mapenterol325.3Unit307.2Unit11055.5451

Mapenterol325.3Unit237.1Unit110125.5451

Mabuterol311.2Unit293.2Unit11075.1221

Mabuterol311.2Unit237.1Unit110135.1221

Ractopamine-d5√307.3Unit167.2Unit110134.171

Fenoterol304.2Unit286.2Unit12083.4571

Fenoterol304.2Unit135.3Unit120153.4571

Ractopamine302.2Unit284.1Unit11064.1671

Ractopamine302.2Unit164.2Unit110124.1671

Penbutolol292.2Unit236.2Unit110126.1121

Penbutolol292.2Unit201Unit110206.1121

Clenbuterol-d9√286.2Unit204.1Unit100134.5911

Clenbuterol277.2Unit259.1Unit10054.6071

Clenbuterol277.2Unit203.1Unit100124.6071

Zilpaterol262.2Unit244.2Unit10072.9681

Zilpatero