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农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2009,17(1):67~72 ·研究论文· 反刍动物饲料中乳源性成分与牛羊肉骨粉的区分* 胡菡1,王加启1**,卜登攀1,魏宏阳1,2,叶巧燕2,刘开朗1,周凌云1 (1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室,北京100193; 2.农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心(北京),北京100193) 摘要:利用奶粉的溶解性,通过水和0.5%次氯酸钠溶液洗涤混有乳源性成分和牛、羊肉骨粉的饲料样品,去除饲料中的乳 粉成分后,再使用16SrDNAPCR方法进行动物源性检测。结果表明,实验所建立的方法能够完全区分饲料中的乳粉与肉骨 粉。当乳粉含量分别为25%、50%和75%时,混合饲料中牛、羊肉骨粉的检出限分别为2%、0.5%和0.1%。此方法操作简单,容易 掌握,可用于鉴别反刍动物饲料中非乳源性成分的牛、羊源性成分。 关键词:反刍动物饲料;奶粉;肉骨粉;16SrDNA;PCR 中图分类号:S188文献标识码:A文章编号:1006-1304(2009)01-0067-06 DistinctionandIdentificationofMilkPowderandBovineor OvineMeatandBoneMealinRuminantFeedstuffs HUHan1,WANGJia-qi1**,BUDeng-pan1,WEIHong-yang1,YEQiao-yan1,LIUKai-lang1,ZHOULin-yun1 (1.StateKeyLaboratoryofAnimalNutrition,InstituteofAnimalSciences,ChineseAcademyof AgriculturalSciences,Beijing100193,China;2.MilkandDairyQualitySupervisionand InspectionEvaluationCenter,MinisterofAgriculture(Beijing),Beijing100193,China) Abstract:Amethodwasestablishedtodistinguishmilkpowderandbovineorovinemeatandbonemealinfeedstuffs,which wereallruminant-derived.Milkpowderinfeedstuffswaswashedandremovedbywaterand0.5%sodiumhypochloritesolution,sub- sequently,theruminant-derivedmaterialswereidentifiedusingPCRaccordingto16SrDNAsequence.Thedetectedlimitationof bovineorovineinfeedstuffswith25%,50%and75%milkpowderconcentrationswere2%,0.5%and0.1%,respectively.Takenalto- gether,thismethodisasimpleandeasilygraspedwayforidentificationanddistinctionofthebovineorovine-derivedmeatandbone mealandmilkpowderinfeedstuffs. Keywords:ruminantfeedstuffs;milkpowder;meatandbonemeal;16SrDNA;PCR 给牛饲喂未经加热处理的牛源性饲料或病源污用PCR方法检测反刍动物饲料中的牛线粒体 染的肉骨粉,是牛海绵状脑病(BSE)传播的主要原DNA,至2007年Pradoetal.(2007)比较4种 因(Kimberlin,1993)。从上世纪90年代开始,世界各RT-PCR方法检测饲料中的反刍动物源性成分, 国先后禁止在反刍动物饲料中添加动物源性成分。PCR方法得到不断的改进和发展。我国也在2006 2004年,我国《动物源性饲料产品安全卫生管理办年发布了饲料中牛、羊源性成分定性PCR方法的国 法》中规定,除乳及乳制品之外的动物源性饲料产家标准(GB/T20190-2006)。王丽(2007)建立了鉴 品,反刍动物饲料中禁止使用同源性动物源成分。因定饲料中牛、羊、猪、鸡和鱼5种动物源性成分的 此,研究建立鉴定区分反刍动物饲料中乳源性与牛、PCR方法,且检出限达到0.1%,贺云霞等(2007)将 羊肉骨粉等成分的方法具有重要意义。鱼源性成分检出限降到了0.05%。乳粉中能提

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