标准文本《木薯叶片中黄酮醇的测定-高效液相色谱法》.pdf

ICS67.050
CCSX04

中华人民共和国国家标准

GB/TXXXXX—XXXX

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木薯叶片中黄酮醇的测定
高效液相色谱法

Determinationofflavonolforcassavaleaves—
High-performanceliquidchromatography

(点击此处添加与国际标准一致性程度的标识)

（征求意见稿）

（本草案完成时间：2022-2-25）

在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

GB/TXXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中国标准化研究院提出并归口。
本文件起草单位：
本文件主要起草人：

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GB/TXXXXX—XXXX

木薯叶片中黄酮醇的测定
高效液相色谱法

1范围

本文件规定了高效液相色谱法测定木薯叶片中黄酮醇的测定方法的原理、试剂与材料、仪器与设备、
试样制备、分析步骤、结果计算与表示、精密度的要求。
本文件适用于木薯新鲜叶片和木薯叶粉中4种黄酮醇类化合物含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T32467化学分析方法验证确认和内部质量控制术语及定义

3术语和定义

GB/T32467界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

试样中黄酮醇经50％乙醇溶液超声波辅助提取，提取液经离心，上清液混合后过滤，用高效液相色
谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

以下所用的试剂，除另有说明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水。

5.1甲醇，CH3OH，色谱纯，CASNO：67-56-1。

5.2无水乙醇，C2H6O，CASNO：64-17-5。

5.3磷酸H3PO4，CASNO：7664-38-2。
5.450％乙醇溶液：取500mL无水乙醇，加入500mL水，混匀。
5.50.2％磷酸溶液：取2mL磷酸，置于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度(现配现用)。
5.64种黄酮醇标准样品：杨梅苷、芦丁、烟花苷、水仙苷，纯度≥98％，见附录A。
5.7微孔滤膜：13mm×0.22µm。

5.8黄酮醇标准溶液配制

5.8.1杨梅苷标准储备溶液：准确称取杨梅苷标准样品10.0mg，加甲醇溶解并定容至10.0mL，配成
浓度为1.0mg/mL标准储备液，在-18℃下密封保存，有效期6个月。
5.8.2芦丁标准储备溶液：准确称取芦丁标准样品60.0mg，加甲醇溶解并定容至10.0mL，配成浓度
为6.0mg/mL标准储备液，在-18℃下密封保存，有效期6个月。
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GB/TXXXXX—XXXX

5.8.3烟花苷标准储备溶液：准确称取烟花苷标准样品30.0mg，加甲醇溶解并定容至10.0mL，配成
浓度为3.0mg/mL标准储备液，在-18℃下密封保存，有效期6个月。
5.8.4水仙苷标准储备溶液：准确称取水仙苷标准样品10.0mg，加甲醇溶解并定容至10.0mL，配成
浓度为1.0mg/mL标准储备液，在-18℃下密封保存，有效期6个月。
5.8.5标准中间工作溶液：分别移取1.0mL的杨梅苷、芦丁、烟花苷、水仙苷标准储备溶液于10mL
棕色容量瓶中，用甲醇定容至10.0mL，获得杨梅苷、芦丁、烟花苷、水仙苷浓度分别为100μg/mL、
600μg/mL、300μg/mL、100μg/mL标准中间工作溶液，在-18℃下密封保存，有效期6个月。
5.8.6混合标准工作液：准确吸取一定体积的混合标准中间液，逐渐稀释，配制成芦丁浓度为1.5μg/mL，
15μg/mL，30μg/mL，150μg/mL，300μg/mL和600μg/mL，烟花苷浓度为0.75μg/mL，1.5μg/mL，
7.5μg/mL，15μg/mL，75μg/mL，150μg/mL和300μg/mL，杨梅苷、水仙苷浓度分别为0.25μg/mL，
2.5μg/mL，5μg/mL，25μg/mL，50μg/mL和100μg/mL的混合标准工作液。标准系列溶液于4℃保
存，有效期7d。

6仪器和设备

6.1高效液相色谱仪：配配紫外检测器或二极管阵列检测器。
6.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。
6.3超声波清洗器：功率≥500W。