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ICS67.100 CCSX16 CNHFA 中国营养保健食品协会团体标准 T/CNHFAXXXX—XXXX 羊乳及其制品中牛和羊(山羊和绵羊)源性 成分定性检测方法 (实时荧光PCR法和毛细管凝胶电泳法) Qualitativedetectionofingredientfrombovineandsheep(OvisariesandCapra hircus)insheepdairyproducts (RealtimePCRandCapillarygelelectrophoresismethod) (报批稿) XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施 中国营养保健食品协会发布发布 T/CNHFAXXXX—XXXX 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由海普诺凯营养品有限公司提出。 本文件由中国营养保健食品协会归口。 本文件起草单位:海普诺凯营养品有限公司、中国检验检疫科学研究院。 本文件主要起草人:侯艳梅、杨艳歌、刘鸣畅、吴亚君、吴桐、谢奎、王洪越、王迎春。 I T/CNHFAXXXX—XXXX 羊乳及其制品中牛和羊(山羊和绵羊)源性成分定性检测方法 (实时荧光PCR法和毛细管凝胶电泳法) 1范围 本文件规定了羊乳及其制品中牛、羊、山羊和绵羊源性成分的实时荧光PCR和毛细管凝胶电泳法定 性检测方法,方法的最低检出限为1%(质量比)。 本文件适用于羊乳及其制品中牛、羊、山羊和绵羊源性成分的定性检测,适用的产品类别包括液体 乳(巴氏杀菌乳、高温杀菌乳、调制乳、灭菌乳、发酵乳),乳粉(全脂乳粉、脱脂乳粉、部分脱脂乳 粉、调制乳粉、乳清粉),婴幼儿配方乳粉等。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27403-2007实验室质量控制规范食品分子生物学检验 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实时荧光PCRReal-timePCR 在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,实现对起始模板的定 量及定性分析。 3.2 毛细管凝胶电泳Capillarygelelectrophoresis(CGE) 将起分子筛作用的凝胶聚合物灌注于毛细管中,以高压直流电场为驱动力的对生物大分子进行分析 检测的技术。 3.3 Ct值Cyclethreshold(Ct) 每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 4.1BSA:Bovineserumalbumin,牛血清白蛋白。 4.2CTAB:cetyltrithylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵。 4.3dATP:deoxyadenosinetriphosphate,脱氧腺苷三磷酸。 4.4dCTP:deoxycytidinetriphosphate,脱氧胞苷三磷酸。 4.5dGTP:deoxyguanosinetriphosphate,脱氧鸟苷三磷酸。 4.6DNA:deoxyribonuleicacid,脱氧核糖核酸。 4.7dNTP:deoxyribonuleosidetriphosphate,脱氧核苷酸三磷酸。 1 T/CNHFAXXXX—XXXX 4.8dTTP:deoxythymidinetriphosphate,脱氧胸苷三磷酸。 4.9EDTA:Ethylenediaminetetraaceticacid,乙二胺四乙酸。 4.10kD:kilodalton,千道尔顿。 4.11PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应。 4.12SDS:Sodiumdodecylsulfate,十二烷基硫酸钠。 4.13Tris:Tris(Hydroxymethyl)aminomethane,三羟甲基氨基甲烷。 4.14Taq:Thermusaquaticus,水生栖热菌。 4.15UNG:uracilN-glycosylase,尿嘧啶N-糖基化酶。 5生物安全措施 为了保护实验室人员的安全和防止污染,应由具备资格的工作人员检测,所有生物安全防护的设施、 设备和安全管理的基本要求按照GB19489有关规定执行。 6方法原理 基于实时荧光PCR的

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