高致病性2型猪链球菌plcR基因敲除株的构建及其相关生物学特性的研究.docx

高致病性2型猪链球菌plcR基因敲除株的构建及其相关生物学特性的研究
高致病性2型猪链球菌（Streptococcussuisserotype2,S.suis2）是一种致命的猪感染病原体。本研究旨在通过敲除S.suis2的PLCR基因，探究该基因在菌株致病性及其相关生物学特性中的作用。
实验方法与步骤：
1.选择S.suis2水平膜片(2,2,b)为基因敲除，利用suicidevector策略进行敲除。
2.构建敲除素pSET4s-plcR，将其电转化入S.suis2水平膜片(2,2,b)，筛选得到删除PLCR基因的串联分子。
3.确认敲除情况，测序验证敲除株正确性。
4.探究敲除株生长特点、致病性以及毒力相关分子差异。
结果：
测序结果表明，确认了PLCR基因的敲除，敲除株与野生型菌株的基因组除了PLCR外完全一致。
敲除株与野生型菌株可以在不含人血浆的条件下生长，但敲除株的生长速度相对较慢，不如野生型菌株。
小鼠致病性试验结果表明，敲除株的致病性比野生型菌株明显下降。
分子机制分析发现，敲除株因PLCR的缺失而导致了多种毒力分子产生与野生型菌株不同的表达差异。
结论：
本研究证明了PLCR基因是S.suis2中影响其致病性及其相关生物学特性的重要基因。敲除PLCR基因不仅可降低S.suis2的毒性，还可能影响其生长特点、细菌样态和代谢物质分布，为S.suis2的研究提供了新的方向。