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2024-11-24
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醛化猪红细胞在犬细小病毒血凝和血凝抑制试验中的应用
【摘要】
犬细小病毒是一种常见的犬传染病,目前在动物医疗领域中常用的检测方法包括血凝和血凝抑制试验。其中,醛化猪红细胞是一种常用的试剂,具有良好的应用效果和广泛的适用范围。本文介绍了醛化猪红细胞的制备方法及其在犬细小病毒血凝和血凝抑制试验中的应用,旨在提供对于该试剂的更深入了解和推广应用。
【关键词】醛化猪红细胞;犬细小病毒;血凝;血凝抑制
【正文】
一、犬细小病毒的传播和危害
犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)是一种犬科动物易感染的病毒,于1978年首次描述。CPV为DNA病毒,表现为排泄物和呼吸道中的高度传染性。其传播途径主要为经口感染,通过口腔黏膜、肠道黏膜等途径进入机体,引起呕吐、腹泻、发热等症状,严重时可以引起死亡。
目前,CPV已经成为国内外狗粮动物保健领域的常见病之一,对于犬类健康及养殖产业的稳定性、安全性具有非常重要的影响。
二、醛化猪红细胞的制备方法
醛化猪红细胞是一种常用于血凝和血凝抑制试验的试剂,具有良好的反应特异性和稳定性。其制备方法如下:
(1)收集猪全血:用肝素液稀释猪全血,防止血凝和红细胞变形。
(2)红细胞沉淀:利用离心机将肝素液稀释的猪全血离心,分离红细胞。
(3)洗涤红细胞:将分离的红细胞用生理盐水连续洗涤3次,去除血清蛋白、血浆蛋白等成分。
(4)醛化处理:将洗涤后的红细胞用0.5%呋喃-3-羧醛(GAC)缓冲液(pH=8.0~9.0)进行醛化处理,反应时间一般为4小时。
(5)洗涤醛化红细胞:用生理盐水进行洗涤,去除未反应的GAC和剩余的醛化剂。
三、醛化猪红细胞的在犬细小病毒血凝和血凝抑制试验中的应用
血凝试验和血凝抑制试验是目前检测CPV的常规方法。血凝试验是利用病毒抗原与相应抗体结合形成凝集物,使红细胞凝胶化;而血凝抑制试验则是利用抑制物质抑制该凝集反应,使红细胞不能凝胶化。
醛化猪红细胞在血凝和血凝抑制试验中均具有广泛的应用。在血凝试验中,它可以用于对CPV抗体滴度、交叉反应等的检测及家犬接种强度的评价;在血凝抑制试验中,则可以用于到CPV抗体的定量测定和家犬疫苗效果的评价。同时,由于醛化红细胞具有较高的生物稳定性和抗原活性,因此被广泛应用于CPV特异性免疫球蛋白的制备。
四、血凝和血凝抑制试验的操作流程
血凝试验操作流程如下:
(1)制备血清、抗体液和醛化红细胞。
(2)在心形玻片上滴加一定量的血清和抗体液。
(3)加入适量的醛化红细胞混匀。
(4)进行检测和判读。
血凝抑制试验操作流程如下:
(1)用试管装入一定量的红细胞、醛化猪红细胞、抗体液和待测样品等。
(2)混匀后加入CPV抗原悬浮液,反应15分钟左右。
(3)进行离心操作,除去上清液后观察红细胞沉淀情况。
(4)进行检测和判读。
五、结论
醛化猪红细胞作为一种常用的试剂,其在犬细小病毒血凝和血凝抑制试验中的应用已经得到了广泛的应用和认可。其制备方法简单,使用方便,并具有良好的稳定性和反应特异性,能够为CPV检测提供可靠的保障,对于保障犬类健康和养殖产业的稳定性具有非常重要的意义。
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