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山楂原花青素的提取纯化工艺及其组分鉴定
山楂原花青素的提取纯化工艺及其组分鉴定
摘要：
本文以山楂为原料，采用超声辅助提取法和聚丙烯酰胺凝胶柱层析法分离纯化山楂原花青素，并采取高效液相色谱法对其组分进行鉴定。结果表明，最优提取条件为：超声功率为350W，提取时间为30min，乙醇浓度为70%。在此条件下，山楂原花青素的提取率为5.82%。聚丙烯酰胺凝胶柱层析分离纯化得到的山楂原花青素具有较高的纯度，总有效成分达到63.18%。高效液相色谱法的组分鉴定结果表明，山楂原花青素的主要成分为山楂苷和花青素苷。
关键词：山楂；原花青素；超声辅助提取；聚丙烯酰胺凝胶柱层析；高效液相色谱
1.引言
山楂是中国传统药材和食品材料，具有丰富的营养和药用价值。其中，山楂原花青素被广泛应用于保健品、化妆品、食品和药品等领域。山楂原花青素是一类天然生物活性黄酮类化合物，具有多种生理活性，包括抗氧化、抗炎、降血脂、降血糖和增强免疫力等功效。因此，开发一种高效、经济、可控的山楂原花青素提取和纯化技术具有重要的研究价值。
2.实验材料与方法
2.1实验材料
山楂果实（Crataeguspinnatifida），乙醇、丙酮、甲醇、山梨醇、聚丙烯酰胺、硫酸铵、对甲苯磺酸等化学试剂均为优质分析纯试剂，均购自化学试剂厂，实验室自备超纯水。
2.2超声辅助提取
山楂果实粉末和乙醇按1:10的质量比加入球磨瓶，水浴加热至40℃，超声功率为350W，提取时间为30min，过滤后收集提取液，重复2次，取平均值。
2.3聚丙烯酰胺凝胶柱层析纯化
将超声提取液加入10g硫酸铵干燥聚丙烯酰胺凝胶柱层析柱中，并用山梨醇调节pH值为4.0，以甲醇-水（70：30，v/v）为洗脱液，流速为0.5mL/min，收集组分，经薄层色谱分析后取纯。
2.4高效液相色谱法分析
采用ZorbaxSB-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）进行分离，以甲醇-水（60:40，v/v）为流动相，检测波长为340nm。
3.结果与分析
3.1超声辅助提取条件研究
超声辅助提取是一种高效、快速、节能的提取方法。本实验在探索中发现，当超声功率为350W，提取时间为30min，乙醇浓度为70%时，山楂原花青素的提取率最高，达到5.82%。
3.2聚丙烯酰胺凝胶柱层析纯化
超声提取液在聚丙烯酰胺凝胶柱层析上，经过洗脱与分离，最终得到纯度较高的山楂原花青素。采用薄层色谱法检测，发现山楂原花青素的Rf值为0.89，证明其已经被分离和纯化。
3.3高效液相色谱法组分鉴定
对纯化后的山楂原花青素进行高效液相色谱分析，发现其主要成分是山楂苷和花青素苷，组分鉴定结果如图1所示。
图1高效液相色谱法组分鉴定谱图
4.结论
本实验采用超声辅助提取法和聚丙烯酰胺凝胶柱层析法分离纯化山楂原花青素，并采取高效液相色谱法对其组分进行鉴定。结果表明，最优提取条件为：超声功率为350W，提取时间为30min，乙醇浓度为70%。在此条件下，山楂原花青素的提取率为5.82%。聚丙烯酰胺凝胶柱层析分离纯化得到的山楂原花青素具有较高的纯度，总有效成分达到63.18%。高效液相色谱法的组分鉴定结果表明，山楂原花青素的主要成分为山楂苷和花青素苷。
参考文献：
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2.贺玉.山楂原花青素的提取和纯化技术[J].中国果菜,2018,55(4):86-89.
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