实验四大肠杆菌发酵培养基的优化说课材料.ppt

大肠杆菌发酵培养基的优化实验目的实验原理1.概念
利用已经设计好的表格--正交表--来安排试验并进行数据分析的一种方法。
它是从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验，这些有代表性的点具备了“均匀分散，齐整可比”的特点，是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。
2.基本工具——正交表
记号：Ln（tm）
L：正交表的符号
n：表的行数（可安排试验的次数）
t：表中的字码数（水平数）
m：表的列数（最多可安排因素个数）

L8(27)L9(34)L16(45)3.正交表的特点
试验点分布均匀、整齐可比
任何一列中各字码（水平）都出现，且出现的次数相等
任何两列中各横行组成的数字对，包含着所有可能的数字对，且各种数字对出现的次数相等4.实验的基本步骤
（1）明确任务确定指标
（2）制定因素水平表
1）确定因素（A、B、C……）
2）选择因素的变化范围
3）确定因素水平数
4）制定因素水平表（3）设计试验方案
1）选择正交表
2）表头设计（不混杂）
3）列出试验方案
4）进行实验因素
实验号直观分析法是通过对每一因素的平均极差来分析问题。
所谓极差就是平均效果中最大值和最小值的差。有了极差，就可以找到影响指标的主要因素，并可以帮助我们找到最佳因素水平组合。
极差的大小反应在所选择的因素水平范围内该因素对测定结果影响的程度。极差大的因素在所选择的因素水平范围内对测定结果的影响最大，在测试过程中必须严格控制。因素
实验号B：然后对计算结果进行分析，分析各因素的主次和影响趋势，找到最优试验方案。若某一因素k3或者k1最大，则说明所选择的该因素的水平范围不合适，如：对于因素C，k3最大，说明因素水平表中所设计的最高水平0.6%不一定为最佳。如果该因素的R值较大，影响较显著，则必须进行重复实验或对照实验。
其中对照实验条件应为：
试验1：A2B2C3
试验2：A2B2C4
C4应大于C3
对照两者的结果，若试验1结果值大于试验2，则试验1条件即为最优化条件。若试验2结果值大于试验1，则应再改变因素C的水平，继续做对照实验，直至达最佳结果。细菌培养物在生长过程中，由于原生质含量的增加，会引起培养物混浊度的增高。细菌悬液的混浊度和透光度成反比、与光密度成正比，透光度或光密度可借助光电比浊计精确测出，因此可用光电比浊计测定细胞悬液的光密度（OD值），表示该菌在特定实验条件下的细菌相对数目，进而反映出其相对生长量。本实验以菌体生物量为指标，用四因素三水平的正交试验确定大肠杆菌的最优培养基。实验步骤因素锥形瓶培养基：标记，加棉塞、报纸包扎。
1ml移液管2支

121℃，灭菌20min将菌种（教师预先培养好）摇匀后用无菌移液管吸取0.5ml悬液，接到每一组培养基中（接种量要完全一样）将三角瓶置于恒温摇床中，37℃，120rpm培养12h五、比浊法测定各发酵液OD值实验结果因素