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赤霉素产生菌原生质体制备、纯化与再生工艺的研究
赤霉素是一种广泛用于植物生长调节和杀虫剂的天然物质。赤霉素产生菌是一种革兰氏阳性、芽孢形成的细菌，其产生的赤霉素可通过切割取得，但由于产量低且大幅度的价格波动，因此研究赤霉素产生菌的原生质体制备、纯化与再生工艺对于大规模生产赤霉素具有重要意义。
一、赤霉素产生菌原生质体制备
原生质体制备是研究菌株形态特征、形态多样性、遗传载体以及遗传异质性的重要方法。赤霉素产生菌原生质体制备过程中卡福菲尔雏形法、Kado研究组提出的聚合酶链式反应（PCR）法、密切配对法（CMP）和MATSUI法被广泛采用。其中，卡福菲尔雏形法将细胞质和线粒体、质粒或大型DNA聚集在一起，形成雏形体，通过超声波处理使雏形体破裂，从而将质粒和其它遗传载体分离出来。CMP法主要是通过质体依赖性的细胞质克隆实现，通过异质原型选择增强细胞质毒性改造、聚集和快速再生的能力，最终达到筛选到能够产生赤霉素的菌种。MATSUI法则是一种利用质体的断裂修复机制来扩增植物病毒和非也非球菌质粒的方法，但在赤霉素产生菌的原生质体制备中应用较少。
二、赤霉素产生菌的纯化
一般采用凝胶层析、高效液相色谱、电泳和分光光度法等方法来纯化赤霉素产生菌的赤霉素，但赤霉素同时与植物体内的其他物质如生长素、植酸等具有相似的性质，从而加大了其纯化难度。凝胶层析法在小规模纯化中可取得良好效果，但其效率随着规模的增大而下降。高效液相色谱法可以较好的分离出赤霉素，其选择各种不同材质的柱子和混合流动相的条件也是影响其分离效率的重要因素。电泳和分光光度法则是常用于分子量较小物质纯化的方法，但对于赤霉素等化合物的纯化具有一定的限制。
三、赤霉素产生菌的再生工艺
再生常用于恢复菌种细胞生长状态以达到成熟分泌体内多次发酵筛选产生目标代谢产物的目的。传统的再生工艺基本上依赖于代谢产物的自然分泌，但由于赤霉素产生菌在自然条件下的产生量非常低且操作方法较为繁琐，因此需要采用多次发酵、分批添加营养物质、控制DO、pH和温度等手段来控制并提高代谢产物的产生量。现代技术可通过点突变法、重组DNA技术以及基因编辑等方法进一步提高赤霉素的产量和再生效率，使赤霉素产生菌的再生工艺更加高效化。
综上所述，赤霉素产生菌原生质体制备、纯化与再生工艺均为研究赤霉素产生菌的重要方向。对于大规模生产赤霉素的实现具有重要意义，同时还为更好地研究代谢产物的生物合成及其代谢调控机制奠定了基础。