《微生物的实验室培养》的教学设计知识课件.doc

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《微生物的实验室培养》的教学设计
一、教学目标
1、知识目标：了解有关培养基的基础知识
2、能力目标：掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术
3、情感目标：养成勇于实践、严谨求实的科学态度
二、教学重点、难点
无菌操作技术
三、教学过程
1、配制微生物培养基
向学生提供几种微生物培养基的配方，让学生通过比较分析各种配养基配方，明确微生物培养基的基本成分包括：碳源、氮源、无机盐和水，有些微生物还需要某些特殊的生长因子。
计算：根据配方比例，计算100mL牛肉膏蛋白胨固体培养基各成分用量。
称量：准确称取各成分。
溶化：加水加热熔化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化钠继续加热；加入琼脂；用蒸馏水定容到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌（防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）
调pH：用1mol/LNaOH溶液调节pH至偏碱性。
灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。
倒平板：待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
2、无菌接种
通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖（不要划破培养基）。灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。将平板倒置放在培养箱中培养。
还可以用涂布法接种：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
3、培养观察
将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃的恒温箱中，培养，在12小时和24小时后，分别观察和记录结果。可安排生物课代表或小组长进行定期观察，并做好计录，以便及时让其他学生观察到自己的实验成果。版权所有，侵权必究联系QQ68843242
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