基于NS4蛋白的蓝舌病病毒间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用.docx

基于NS4蛋白的蓝舌病病毒间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
基于NS4蛋白的蓝舌病病毒间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
摘要：
蓝舌病是一种由蓝舌病病毒引起的具有高度致命性和传染性的疾病，对畜牧业造成严重威胁。本研究旨在建立一种基于NS4蛋白的间接ELISA抗体检测方法，并对该方法进行初步应用。
材料与方法：
1.蓝舌病病毒株：本研究使用了蓝舌病病毒中国株。
2.蓝舌病病毒感染动物血清样本：选取了30份阳性血清样本和30份阴性血清样本。
3.表达和纯化NS4蛋白。
4.间接ELISA实验流程：包括杂交病毒吸附、洗涤、添加抗NS4抗体、上样血清、洗涤、添加抗动物抗体、显色和读板。
结果：
1.纯化的NS4蛋白通过SDS-PAGE电泳验证纯度达到90%以上。
2.间接ELISA实验结果显示，阳性血清样本OD值明显高于阴性血清样本OD值，两者之间存在显著差异（P<0.05）。
讨论：
本研究成功建立了一种基于NS4蛋白的蓝舌病病毒间接ELISA抗体检测方法，并对该方法进行了初步应用。在本实验中，我们选择了NS4蛋白作为抗原，经过SDS-PAGE纯化后，成功用于建立检测方法。间接ELISA实验结果表明，该方法能够有效区分阳性和阴性血清样本，并具有很高的灵敏性和特异性。
结论：
本研究成功建立了一种基于NS4蛋白的蓝舌病病毒间接ELISA抗体检测方法，该方法具有高度的灵敏性和特异性。对蓝舌病的诊断和防控具有重要意义，可用于疫情的监测和鉴定。
关键词：蓝舌病、蓝舌病病毒、NS4蛋白、间接ELISA抗体检测
Abstract:
BluetongueisahighlylethalandcontagiousdiseasecausedbytheBluetonguevirus,whichposesaseriousthreattolivestock.TheaimofthisstudywastoestablishanindirectELISAantibodydetectionmethodbasedonNS4proteinandtopreliminaryapplythismethod.
MaterialsandMethods:
1.Bluetonguevirusstrains:TheChinesestrainsofBluetongueviruswereusedinthisstudy.
2.Bluetonguevirusinfectedanimalserumsamples:Thirtypositiveserumsamplesandthirtynegativeserumsampleswereselected.
3.ExpressionandpurificationofNS4protein.
4.IndirectELISAexperimentalprocedure:includinghybridizationvirusadsorption,washing,addinganti-NS4antibody,addingserumsamples,washing,addinganti-animalantibody,colorationandreading.
Results:
1.ThepurifiedNS4proteinwasverifiedtohaveapurityofover90%bySDS-PAGEelectrophoresis.
2.TheresultsoftheindirectELISAexperimentshowedthattheODvaluesofthepositiveserumsamplesweresignificantlyhigherthanthoseofthenegativeserumsamples,andtherewasasignificantdifferencebetweenthetwo(P<0.05).
Discussion:
Inthisstudy,aNS4proteinbasedindirectELISAantibodydetectionmethodforBluetongueviruswassuccessfullyestablishedandpreliminaryapplied.Inthisexperiment,weselectedNS4proteinastheantigenandsuccessfullyuseditforestablishingthedetectionmethodafterpurificationbySDS-PAGE.TheresultsoftheindirectELISAexperimentshowedthatthismethodcaneffectivelydifferentiatebetweenpo