神农香菊茎叶废弃物中多糖与总黄酮的含量测定和抗氧化活性研究.docx

神农香菊茎叶废弃物中多糖与总黄酮的含量测定和抗氧化活性研究
神农香菊是一种传统中药材，它的主要功效是清热解毒、消肿止痛。而神农香菊茎叶在中药炮制过程中往往被废弃，造成了浪费资源的局面。本文旨在通过测定神农香菊茎叶中多糖和总黄酮的含量以及抗氧化活性，探索其废弃物的潜在利用价值。
1.实验材料和方法
1.1实验材料
从一家药材公司购买神农香菊茎叶废弃物。
1.2实验方法
1.2.1多糖含量测定
多糖含量的测定采用天然橡胶法，实验操作如下：
1）取一定量的干燥样品，粉碎并筛选至0.5mm的颗粒大小；
2）将样品加入50ml离子交换水中，并在水浴中回流30min；
3）将回流液离心，取上清液并加入1%的酚-硫酸试剂，再加入浓度为5%的硫酸试剂，轻轻摇动试管2~5s，置于水浴中煮沸10min；
4）待试管冷却后，加入4ml离子交换水，搅拌均匀后使用紫外光光度计测定其吸光度，得到A。
5）将余下的样品重复以上步骤，依次加入2、3、4、5倍的酚-硫酸试剂，得到B、C、D、E的吸光度。
6）设标准曲线，计算多糖含量。
1.2.2总黄酮含量测定
总黄酮含量的测定采用酸性水解-乙醇析出法，实验操作如下：
1）取0.5g样品，加入50ml琼脂糖-酸性醇（2:1，v/v）混合液中，置于水浴中回流2h，冷却后离心；
2）取1.0ml上清液，加入梅酸（1.0ml）、乙醇（24.0ml）中，放置20h；
3）采用Buchner筒过滤析出，草酸钠溶液洗涤，洗涤2次后，用小量水淋洗可减少灰分的干扰。
4）用乙醇将滤液浓缩至2~3ml，再用氮气吹干，加3ml80%乙醇使多糖溶解后，稀释成所需浓度，即可用于测定。
5）取上述样品2.0ml，加入硼酸-酒石酸缓冲液（1:1，v/v，2.0ml）、铝酸钾（0.1g）和镁丝（10mg），加热至沸腾，恒温沸腾20min，然后冷却至室温；
6）用0.5%硼酸酒精溶液调节至25ml，用紫外分光光度计检测吸光度，计算总黄酮含量。
1.2.3抗氧化活性测定
抗氧化活性的测定采用DPPH法（2,2-二苯基-1-苯基-1-丙酮基氢磷酸盐自由基法），实验操作如下：
1）取一定量的样品，加入不同浓度的溶媒后，再加入0.1mM的DPPH酚溶液，在室温下静置20min；
2）用紫外分光光度计测量DPPH溶液和样品的吸光度，计算抗氧化活性。
2.结果和分析
2.1多糖和总黄酮含量
通过实验测定，神农香菊茎叶废弃物中多糖含量为6.08%（w/w），总黄酮含量为2.48%（w/w)。
2.2抗氧化活性
根据实验结果，神农香菊茎叶废弃物具有一定的抗氧化活性。其中，在浓度为0.1mg/mL时，其DPPH自由基清除率为33.33%；在浓度为1mg/mL时，其DPPH自由基清除率达到了72.22%。这表明，在一定浓度范围内，神农香菊茎叶废弃物可以有效地清除自由基，发挥抗氧化功效。
3.结论
从实验结果来看，神农香菊茎叶废弃物中多糖和总黄酮的含量较高，同时还具有一定的抗氧化活性。这表明，神农香菊茎叶废弃物具有很好的潜在利用价值。可以通过开发其作为原料制备保健品等产品，从而减少资源浪费并提高神农香菊的产值。还需要进一步的研究，深入探究神农香菊茎叶废弃物的化学成分和其它功效，为其进一步利用提供支持。