微生物检验学之衣原体及检验.doc

衣原体及检验
一、概述（一）概念衣原体是一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。由于它具有一些与细菌类似的生物学特性，现归属于广义的细菌范畴。
（二）分类与命名1.传统分类法按第九版Bergey细菌学分类手册，衣原体属于衣原体目、衣原体科、衣原体属。根据衣原体的抗原构造和DNA同源性的特点，将衣原体属分为四个种，包括沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体和家畜衣原体。能引起人类致病的主要是前三种。沙眼衣原体可分三个生物亚种，即沙眼生物亚种、性病淋巴肉芽肿生物亚种（LGV）及鼠生物亚种。其中沙眼亚种又分A～K14个血清型；LGV生物亚种又分4个血清型L1、L2、L2a和L3。前两个亚种对人类有致病性，鼠亚种则不侵犯人类。肺炎衣原体是衣原体属中的一个新种。只有一个血清型，即TWAR组。2.分子生物学特性分类法该法主要是从衣原体种系发生上分析和评价传统分类法。
二、生物学性状1.发育繁殖周期与形态染色衣原体在宿主细胞内生长繁殖有独特的发育周期，可见到两种形态结构不同的颗粒。（1）原体：呈球形或椭圆形，直径约0.3μm，外有胞壁，内含致密的核质，为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色。在细胞外较为稳定，无繁殖能力，但有高度的感染性。
（2）网状体又称始体：呈球形或椭圆形，直径0.5～1μm，无胞壁，胞浆内无致密的核质，而有纤细的网状结构。吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的繁殖型，代谢活泼，不能自胞外存活，无感染性。衣原体的发育周期：原体当与易感细胞表面的特异受体吸附后，通过细胞的吞饮作用进入细胞，形成吞噬小泡。原体在泡内变软，增大为网状体。约8小时后，网状体在空泡内以二分裂方式繁殖、聚集，构成各种形状的包涵体。感染18～24小时后，网状体浓缩形成具有坚韧细胞壁的原体，最后随宿主细胞破裂而释出，再感染新的易感细胞，开始新的发育周期。每个发育周期约需40～72小时。
2.抗原成分衣原体的抗原性相当复杂，有属、种、型等特异性抗原。（1）属特异性抗原：衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原。其与革兰阴性菌LPS结构不同，缺乏O-多糖和部分核心多糖，无典型内毒素生物学活性。长期应用于衣原体血清学诊断。（2）种特异性抗原：主要位于外膜蛋白（MOMP）上。（3）型特异性抗原：也位于MOMP上，用单克隆抗体作微量免疫荧光试验可识别衣原体各血清型。
3.分离培养特性衣原体专性细胞内寄生。绝大多数能在6～8日龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖，并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒，也可在传代细胞（如HeLa-299和Mc-Coy等细胞株）中培养。4.抵抗力衣原体抵抗力弱，沙眼衣原体感染材料在35～37℃条件下，经48小时左右即失去活性。不耐热，加热50℃经30分钟或56～60℃5～10分钟可杀死，但耐寒，在冰冻条件下可存活数年。鹦鹉热衣原体比沙眼衣原体稳定。对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。
三、临床意义人类衣原体病主要包括：（一）沙眼衣原体1.沙眼由沙眼生物亚种A、B、Ba和C四个血清型引起。主要通过眼-眼或眼-手-眼（常通过公用毛巾等媒介）的途径进行直接或间接接触传播。2.包涵体结膜炎由沙眼生物亚种B、Ba、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K血清型引起。包括婴儿及成人两类。婴儿经产道时该亚种可致包涵体结膜炎和婴幼儿肺炎。
3.泌尿生殖道感染主要由沙眼生物亚种D-K血清型引起，是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染的主要病原。衣原体感染是男性尿道炎最常见的病因之一。未经治疗者多数转为慢性，周期性加重，或可合并附睾炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宫颈炎、阴道炎、盆腔炎，也可与妇女不孕症有关。衣原体常与淋病奈瑟菌混合感染，淋病奈瑟菌对衣原体的繁殖起激活和促进作用。4.性病淋巴肉芽肿由沙眼衣原体LGV生物亚种（L1、L2、L2a、L3）血清型引起，主要通过性接触传播。引起以化脓性腹股沟淋巴结炎为特征的性病，又称第四性病。主要侵犯淋巴组织，女性以累及会阴、肛门、直肠及盆腔淋巴结多见，男性以累及腹股沟淋巴结为常见，发生化脓性炎症和慢性肉芽肿，有些可形成瘘管。
（二）鹦鹉热衣原体主要引起鸟类或家禽感染，由感染该衣原体的鸟类等动物的粪便污染环境，以气溶胶形式传给人类。使人类发生上呼吸道感染、肺炎和毒血症。典型临床表现为非典型肺炎。也有引起心内膜炎的报道。（三）肺炎衣原体其传播方式主要是人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播。引起青少年急性呼吸道感染，以肺炎为主，常可呈地方性、散发性流行，也可引起支气管炎、咽炎等。该衣原体也可引起慢性感染，其与急性心肌梗死和慢性冠心病的关系越来越引起注意。
四、微生物检验1.标本采集与处理（1）