水质分析微生物检测培训总结.doc

水质分析微生物检测培训总结

2012年5月14日至5曰17日，我参加了由武汉水务集团有限公司水质监测中心举办的为期四天的水质分析微生物检测培训班。本次培训班主要针对生活饮用水中细菌数指标即细菌总数和总大肠杆菌群的分析方法而进行的培训，通过这次培训，使我受益匪浅，以下是对这次学习作的一个总结：
一通过学习，了解到水中所含有的细菌来源于空气、土壤、污水、垃圾和动植物的尸体，所以水中细菌的种类是多种多样的，其中包含病原菌、通过水传播的疾病有痢疾、伤寒、霍乱、肝炎和急性肠胃炎等，这些将对人体健康具有潜在的危害性，原水经过净化消毒后，细菌总数和大肠杆菌群指数如果能达到饮用水标准的要求，说明病原菌被杀灭，普通细菌也明显减少，因此水中细菌总数和总大肠杆菌群的测定是评价水质清洁程度和考核给水净化效果的指标之一。
二水中细菌的检测方法
1细菌总数（平皿计数法）：水样在营养琼脂上在有氧条件下37℃培养48小时后，所得1mL水样所含菌落的总数。
以无菌操作方法用无菌吸管吸取1mL充分混匀的水样注入灭菌平皿中，倾注约15mL已融化并冷却45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋匀平皿，使水样与培养基充分混匀，待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上
，置于36±1℃培养箱内培养48小时，进行菌落计数，此即为水样1mL中的菌落总数。
2总大肠菌群检测方法有：多管发酵法、滤膜法、酶底物法
2.1多管发酵法：总大肠菌群指一群在37℃培养24小时能发酵乳糖，产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。取10mL水样接种到10mL双料乳糖蛋白胨培养液中，取1mL水样注入到9mL灭菌生理盐水中，混匀后吸取1mL注入到10mL单料乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管，将各种管置36±1℃培养箱内培养24±2小时，如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总大肠菌群阴性，如有产酸产气者，将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，于36±1℃培养箱内培养18~24小时，观察菌落形态，挑取符合特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证实实验。
2.2滤膜法：总大肠菌落滤膜法是指用孔径为0~4.5um的微孔滤膜过滤水样，将滤膜贴在掺加乳糖的选择性培养基上37℃培养24小时，能形成特征性菌落的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。
用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面朝上贴放在已灭菌的滤床上，固定好滤器，将100mL水样注入滤器中，打开滤器阀门，在-5.07*104Pa下抽滤，水样抽滤完后再抽气约5秒，关上滤器阀门，取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在红亚硫酸钠培养基上，滤膜截面细菌面向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将平皿倒置，放入37℃恒温箱内培养24±2小时，挑取符合特征菌落进行革兰氏染色，镜检。
2.3酶底物法：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体是培养基呈现颜色变化，以此来检测水中总大肠菌群。
以上是我这次培训所学内容的小结，通过学习，不仅提高了细菌分析的知识，也为以后开展新的微生物项目打下了良好的基础。