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基因工程细胞工程胚胎工程学案 基因工程与克隆技术基因工程相关知识整合(2)基因工程的基本操作步骤中哪几处用到了限制酶,其特性和来源是什么?又有哪几处涉及碱基互补配对? 答案限制酶在第1、2步中用到而且要求同一种,目的是产生相同的黏性末端;限制酶主要从原核生物中分离纯化而来,它能识别DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键,产生的末端有黏性末端和平末端;只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对,其余三个步骤都涉及碱基互补配对。(3)基因表达载体如何构建? 答案(4)将目的基因导入受体细胞的常用方法? 答案植物细胞:农杆菌转化法;动物细胞:显微注射法;微生物:Ca2+处理法。 (5)目的基因的导入与表达如何进行检测与鉴定? 答案①分子水平检测 a.插入检测:DNA分子杂交技术,即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。 b.表达检测 ②个体生物学水平鉴定:对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。(沈阳质检)转基因植物油是由转基因植物通过压榨或浸出法加工制得的,因其出油率高而被广泛采用。我国是植物油消费大国,每年都从国外进口大量的转基因植物油。 (1)在培育转基因油料植物的过程中,基因操作需要的工具酶是 。在基因表达载体中,目的基因的首端必须含有 ,它是 识别和结合位点。 (2)请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以采用的方法: 。若受体细胞为植物体细胞,可采用 技术获得转基因植物体,该技术所依据的原理是 。(3)若要检测(2)中获得的植物细胞染色体上是否含有目的基因,可采用 技术。而想要得知上述植物是否真的出油率高,应如何做? 。 (4)若利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率,其设计流程应从预期的 出发,设计预期的 结构,推测出应有的 序列,然后找到相对应的 序列,再用转基因技术改变其现有性状。植物组织培养和植物体细胞杂交(1)上述两过程依据的原理是什么? 答案植物组织培养:细胞全能性;植物体细胞杂交:细胞膜的流动性和细胞的全能性。 (2)在植物体细胞杂交过程中,原生质体经诱导剂处理后,会有几种细胞类型? 答案5种:甲、乙、甲甲、乙乙、甲乙 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力,但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究,用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交,培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题:(1)②过程可用聚乙二醇(PEG),其目的是 。 (2)请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程: 。由此过程 可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性,这是 。 (3)在培养基上培养一段时间后,原生质体会再生出细 胞壁。可以取样,通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。(5)请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处: 。 图示动物细胞培养、细胞核移植和单克隆抗体制备过程,并思考以下问题。1516(1)上述过程的原理是什么? 答案①动物细胞培养:细胞增殖;②细胞核移植:细胞核全能性;③单克隆抗体的制备原理:a.免疫原理:经免疫的B淋巴细胞产生特异性抗体。b.增殖原理:骨髓瘤细胞能在体外培养的条件下大量增殖。 c.融合原理:细胞膜的流动性以及病毒对宿主细胞的穿透性。 (2)区分原代培养和传代培养、细胞株和细胞系。 答案原代培养:可有两种表述。a.细胞悬浮液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养;b.第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。两种表述没有本质区别。①体外培养 ②人工授精 ③胚胎移植 ④核移植 核移植技术、胚胎移植 后者可以用于治疗需要骨髓移植或造血干细胞移植等的疾病,胚胎在移植前需进行遗传学诊断 受体母牛产下胚胎移植的犊牛 后者可以用于治疗需要骨髓移植或造血干细胞移植等的疾病,胚胎在移植前需进行遗传学诊断 牛、羊要培养到桑椹胚或囊胚阶段; 完整分析单克隆抗体的制备首先是将经过免疫的B (2)动物细胞培养需要在含 混合气体的培养箱中进行,培养液中通常需加入 等一些天然成分。 (4)“试管婴儿”技术诞生后,继而出现了“设计试管婴儿技术”,二者在对人类作用上的区别是 。 “试管婴儿”技术是通过将不孕夫妇的精子和卵细胞取出在试管中完成受精,并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊胚阶段,再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。 将该植物制出植物油与同等质量的非转基因植物制出 答案植物组织培养:细胞全能性; 图示动物细胞培养、细胞核移植和单克隆抗体制备过程,并思考以下问题。 答案受精的标志是卵黄膜和透明带的间隙出现两个极体; 用于生育,产生新个体 (4)将目的基因导入受体细胞的常用方法? 基因工

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