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微生物检验(29)

临床医学检验考试辅导《微生物检验》临床标本微生物检验概述●考点临床标本微生物学检验（血液.脑脊液.痰.尿液.粪便.性传播疾病.创伤）（1）常见病原菌（2）标本采集及运送（3）检验方法（4）临床意义
一.临床标本细菌检验的基本程序
二.血液感染◆正常人的血液是无菌的。
◆菌血症是指在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性在血中存在。
◆败血症是指病原菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身中毒症状。
◆脓毒血症是指化脓性细菌败血症时，细菌通过血流扩散至全身其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。
（一）常见病原菌革兰阳性菌革兰阴性菌球菌金葡.CNS.A/B链球菌.肺炎链球菌.肠球菌.草绿色链球菌脑膜炎球菌.卡他布兰汉菌杆菌产单核李斯特菌.炭疽杆菌.结核分枝杆菌.产气荚膜梭菌大肠杆菌.（副）伤寒沙门菌.克雷伯菌.沙雷菌.绿脓杆菌.不动杆菌.气单胞菌.流感嗜血杆菌.布鲁菌.嗜肺军团菌.类杆菌真菌假丝酵母菌.曲霉菌.隐球菌.球孢子菌
（二）标本采集
1.采血时间和频率◆病人发热初期或高峰期采集，或在未用抗生素前采集。但怀疑细菌性心内膜炎时，血培养不少于三次。
2.采血量◆一般为静脉采血，成人采血量10～20ml，儿童3～5ml，婴儿1～2ml。
3.床边直接注入血液培养基，否则用SPS抗凝剂送检，不得用EDTA，枸橼酸钠抗凝。
4.检查血管内导管有无细菌污染，可无菌操作，剪下导管5cm远侧段，置无菌容器内送检。
（三）微生物分离培养和鉴定
1.培养基的选择◆用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶，如需氧＋厌氧，需氧＋高渗等。
2.分离和鉴定当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时，应及时作如下检验：◆（1）涂片染色镜检，结果及时与临床联系；◆（2）转种血平板.巧克力平板.厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；◆（3）同时做药敏试验，结果及时报告临床作治疗参考。
（四）报告方式阴性结果：◆7d报告无细菌生长。
◆疑为亚急性细菌性心内膜炎.布鲁菌病.厌氧菌血症.真菌血症时，血培养至少连续培养2～3周，仍无细菌生长者可报告为阴性。
阳性结果三级报告方式：◆第一级报告告知标本已出现阳性并报告直接细菌涂片结果，同时做初步药敏试验；◆第二级是报告初步药敏结果，同时做正式鉴定和药敏试验；◆第三级报告正式鉴定和药敏试验结果。
（五）临床意义◆葡萄球菌菌血症常由疖.痈.脓肿及烧伤创面等原发感染灶继发，也可由呼吸道感染引起。
◆G-菌主要侵犯危及机体免疫功能低下的病人，耐药菌株不断增加。
◆厌氧菌的菌血症常合并需氧菌感染，临床症状较重而复杂。
◆L型菌的菌血症主要由于使用抑制细菌细胞壁合成的抗生素后，由缺损细胞壁的细菌感染所致。
◆免疫低下者常出现真菌菌血症。
◆院内感染菌血症不断上升。
三.中枢神经系统感染
（一）常见病原微生物革兰阳性菌革兰阴性菌病毒真菌及其他葡萄球菌肺炎链球菌草绿色链球菌A.B群链球菌结核分枝杆菌产单核李斯特菌消化链球菌脑膜炎奈瑟菌卡他莫拉菌流感嗜血杆菌肠杆菌科细菌非发酵菌类杆菌乙型脑炎病毒柯萨奇病毒脊髓灰质炎病毒新肠道病毒68-71型狂犬病病毒新生隐球菌假丝酵母菌钩端螺旋体
（二）标本采集◆用药前，无菌操作腰穿方法采集2～3ml，盛于无菌试管常温下立即送检。
◆天冷时保温，不可冰箱保存。
◆用于病毒检测时应冷藏送检。
（三）检验方法
1.涂片镜检离心3000rpm，15分钟。
革兰染色（一般细菌）.抗酸染色（分支杆菌）.墨汁染色（隐球菌）.电镜检查（病毒颗粒）。
2.分离培养5g/L葡萄糖增菌肉汤.血平板.中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板.巧克力平板。
结核菌接种罗-琴培养基或米氏7H10培养基。真菌培养接种沙氏培养基。病毒培养常用动物接种.鸡胚接种.细胞培养。
3.血清学检测可直接检测抗原。
（四）临床意义◆细菌性脑膜炎是中枢神经系统感染的常见类型。
◆真菌性脑膜炎最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母.球孢子性脑膜炎日渐增多，特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易发。
◆流行性乙型脑炎可获得持久免疫力，再次发病者极少见。
◆肠道病毒对中枢神经系统的危害性逐渐引起人们的关注和重视。
四.呼吸道感染呼吸道按解剖结构分为上呼吸道和下呼吸道。
◆上呼吸道感染主要指喉及喉以上的呼吸道感染。
◆下呼吸道感染主要指气管.支气管和肺的感染。
（一）上呼吸道的正常菌群
1.球菌凝固酶阴性葡萄球菌，链球菌，微球菌，奈瑟菌，厌氧球菌。
2.杆菌棒状杆菌，嗜血杆菌，类杆菌，梭杆菌。
（二）常见病原微生物革兰阳性菌革兰阴性菌球菌杆菌真菌病毒葡萄球菌，肺炎链球菌，化脓性链球菌，肠球菌白喉棒状杆菌，结核分枝杆菌，炭疽芽胞杆菌白假丝酵母菌，隐球菌，曲霉，毛霉（副）流感病毒，