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精品医学文档齐鲁医学外周血PBMC的分离-1--2-精品医学文档外周血PBMC的分离原理外周血各种血细胞的密度不尽相同利用淋巴细胞分层液（Ficoll）作密度梯度离心使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布从而将各种血细胞加以分离。1.093外周血红细胞粒细胞单个核细胞血小板淋巴细胞单核细胞1.030~1.0351.075~1.090Ficoll：1.077±0.001(PBMC)1.0921500rpm20℃30minPBMC红细胞粒细胞Ficoll稀释外周血Ficoll稀释的血浆、血小板实验步骤1.采血稀释（外周血：稀释液=1：2）2.在离心管中加入Ficoll沿倾斜的管壁缓缓加入稀释的外周血（Ficoll：稀释血=1：2）3.18℃1500r/min离心30min4.轻轻吸取PBMC层移入另一试管中5.加足量稀释液充分洗涤1800r/min离心5min弃上清。注意事项每毫升外周血液大约可获1×106单个核细胞Ficoll应适量外周血应充分稀释温度直接影响到Ficoll的比重和分离效果在Ficoll上加入稀释外周血时应缓慢加以免冲散界面吸取单个核细胞层时应避免吸出过多的上清液或分层液而导致血小板污染
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