一种检测动物源性食品中兽药残留方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110849990A(43)申请公布日2020.02.28(21)申请号201911106138.9(22)申请日2019.11.13(71)申请人中国肉类食品综合研究中心地址100068北京市丰台区洋桥70号(72)发明人王守伟赵文涛郭文萍李莹莹李石磊郭超李志刚姜锐王娟强王妍张颖颖宋永青陈超魏颖慧(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人陈征(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/36(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书27页附图2页(54)发明名称一种检测动物源性食品中兽药残留方法及其应用(57)摘要本发明涉及一种检测动物源性食品中兽药残留的方法及其应用，所述方法包括将动物源性食品经提取、净化后进行高效液相色谱-高分辨质谱分析；所述高效液相色谱条件为：色谱柱：AgilentEclipseplusC18；流动相：A：0.1％甲酸-水溶液B：乙腈；洗脱程序：0～0.5minA的含量保持95～98％，0.5～20minA的含量线性变化至0，20～25minA的含量维持0，25～28minA的含量维持95～98％。本发明的检测动物源性食品中兽药残留的方法可以提取并检测各类动物源食品中155种兽药残留，通过高效液相色谱-高分辨质谱联用技术可以对兽药残留同时进行定性和定量分析。CN110849990ACN110849990A权利要求书1/2页1.一种检测动物源性食品中兽药残留的方法，其特征在于，包括：将动物源性食品经提取、净化后进行高效液相色谱-高分辨质谱分析；所述高效液相色谱的条件为：色谱柱：AgilentEclipseplusC18；流动相：A：0.1％甲酸-水溶液B：乙腈；洗脱程序：0～0.5minA的含量保持95～98％，0.5～20minA的含量线性变化至0，20～25minA的含量维持0，25～28minA的含量维持95～98％。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件为：色谱柱：AgilentEclipseplusC18；流动相：A：0.1％甲酸-水溶液B：乙腈；洗脱程序：0～0.5minA的含量保持98％，0.5～20minA的含量由98％线性变化至0，20～25minA的含量维持0，25～28minA的含量维持98％。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述将动物源性食品经提取、净化的具体步骤为：将所述动物源性食品加入提取液中，混匀离心后取上清液过PrimeHLB固相萃取柱；其中，所述提取液包括以下质量百分比的成分：0.15～0.25％甲酸、75～85％乙腈。4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，在所述进行高效液相色谱-高分辨质谱分析后，进行如下步骤：(1)将获取的母离子和二级碎片离子的质核比、保留时间，和各兽药的基质加标样品中的相应标准进行对比，对所述动物源性食品中的兽药残留进行定性分析；(2)通过外标法检测各兽药的浓度，对所述动物源性食品中的兽药残留进行定量分析。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述兽药为磺胺苯吡唑、磺胺苯酰、磺胺吡啶、磺胺醋酰、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺恶唑、磺胺二甲基异唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲异嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺氯吡嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺脒、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺甲噻二唑、奥比沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、氟甲喹、氟罗沙星、环丙沙星、洛美沙星、萘啶酸、诺氟沙星、培氟沙星、沙拉沙星、双氟沙星、司帕沙星、伊诺沙星、氧氟沙星、克伦特罗、莱克多巴胺、氯丙那林、喷布特罗、异丙喘宁、福莫特罗、非诺特罗、塞布特罗、班布特罗、苯乙醇胺A、噻苯达唑、沙丁胺醇、特布他林、妥布特罗、西马特罗、氟苯尼考、金霉素、强力霉素、四环素、土霉素、红霉素、吉他霉素、林可霉素、泰乐菌素、替米考星、泰万菌素、竹桃霉素、罗硝达唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟甲基甲硝咪唑、甲硝唑、奥芬达唑、苯硫氨酯、芬苯达唑、氨苄西林、苯唑西林、氯唑西林、双氯西林、青霉素、头孢匹啉、头孢喹肟、头孢噻呋、头孢氨苄、19-去甲睾酮、醋酸甲孕酮、睾酮、甲基睾酮、氯丙嗪、阿扎哌隆、异丙嗪、乙酰丙嗪、地西泮、多拉菌素、伊维菌素、马杜霉素、盐霉素、莫能菌素、喹恶啉-2-羧酸、卡巴氧、喹乙醇、脱氧卡巴氧、左旋咪唑、克百威、蝇毒磷、倍硫磷砜、倍硫磷亚砜、马拉硫磷、辛硫磷、敌百虫、甲氧苄啶、阿托品、普鲁卡因、利多卡因、东莨菪碱、山莨菪碱、磺胺、马布特罗、头孢唑啉、金刚烷胺、金刚乙胺、利巴韦林、奥司他韦、差向土霉素、差向金霉素、去甲基金霉素、甲苄喹啉、氯2CN11