一种油菜花粉酶解肽的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105669828A(43)申请公布日2016.06.15(21)申请号201610090425.5(22)申请日2016.02.18(71)申请人襄阳利高乐生物化学科技有限公司地址441000湖北省襄樊市国际创新产业基地11号楼(72)发明人张军徐晓云顾红涛和平侯秋飞(51)Int.Cl.C07K1/16(2006.01)C07K1/14(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种油菜花粉酶解肽的制备方法(57)摘要本发明公开了一种油菜花粉酶解肽采用超微粉碎法破壁，操作简单，无水添加，破壁率高，免除溶剂操作，有利于后序活性成分提取的制备方法。它是将油菜花粉去污洗干净、滤水，然后按一定比例加入低沸点的醇及其他有机溶剂进行回流三次萃取。采用特制的真空、微波、低温干燥设备相结合的方法对油菜花粉提取物进行干燥，保持相关活性成分不变，又能降低干燥温度，加快干燥速度。采用大孔吸附树脂C18反相硅胶柱层析-特制备色谱联用技术分离纯化，制得油菜花粉提取物的含量为90%的产品。进一步用我公司制备一种特定溶剂，进行重结晶提纯油菜花粉提取物的纯度达95%以上。通过正交试验确定油菜花粉提取化合物提取、萃取、干燥、纯化分离、重结晶的最佳工艺。本发明的制备方法具有工艺操作比较稳定，提取物收率比较高，纯度高，对环境无污染，适合现代化工业自动化生产的要求。CN105669828ACN105669828A权利要求书1/1页1.一种油菜花粉酶解肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤：取洗干净油菜花粉原料，采用超微粉碎法破壁，置于植物提取罐中，加入乙醇浓度为60％，花粉与溶剂的重量体积比为1：15，提取温度65℃，提取时间120min，提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，二氯甲烷萃取制备后得稠膏，加入乙醇进行制备色谱分离，得到油菜花粉酶解肽。2CN105669828A说明书1/5页一种油菜花粉酶解肽的制备方法技术领域[0001]本发明涉及油菜花粉酶解肽提取技术，具体地说，涉及一种油菜花粉酶解肽的制备方法。背景技术[0002]油菜，又叫油白菜，苦菜，拉丁文名：BrassicacampestrisL.十字花科、芸薹属植物，原产我国，其茎颜色深绿，帮如白菜，属十字花科白菜变种，花朵为黄色。农艺学上将植物中种子含油的多个物种统称油菜。目前油菜主要栽培（品种）类型为：白菜型油菜（Brassicarapa(campestris)L.），芥菜型油菜（BrassicajunceaL.），甘蓝型油菜（BrassicanapusL.）。油菜花粉含有丰富的功能性物质（包括蛋白质、维生素、微量元素、黄酮类化合物），这些物质协同作用于机体，调节机体的多种功能，平衡体内营养，增强新陈代谢，防止毛细血管通透性的障碍。花粉还能促进内分泌腺的发育，有提高和调节内分泌腺分泌功能，因此对由内分泌功能紊乱引起的疾病起到了治疗作用。油菜花粉益肾、固本、强腰，而且含黄酮醇较高，具有抗动脉粥样硬化、治疗静脉曲张性溃疡、降低胆固醇和抗辐射的作用。增强人体综合免疫功能：花粉多糖能激活巨噬细胞的吞噬活动，提高人体抗病能力。防衰老、美容作用：蜂花粉属营养性的美容化妆品，花粉中的VE、超氧化歧化酶（SOD）、硒等成分能滋润营养肌肤，恢复皮肤的弹性和光洁。花粉中的肌醇可使白发变黑，脱发渐生，保持头发乌黑亮丽。防治脑心血管疾病：花粉中的黄酮类化合物能有效清除血管壁上脂肪的沉积，从而起软化血管和降血脂的作用。防治前列腺疾病：花粉是前列腺炎的克星，以油菜花粉、荞麦花粉效果最佳。减肥：服用蜂花粉可以吸收足够的营养，造成饱食感。同时，花粉中的卵磷脂可燃烧过剩的脂肪，达到减肥的目的。调节肠胃功能：花粉有许多杀菌成分，能杀灭大肠杆菌等，并能防治便秘。保肝护肝：花粉中的黄酮类化合物同样可防止脂肪在肝上的沉积。调节神经系统，促进睡眠。辅助治疗其他疾病：花粉对贫血、糖尿病、改善记忆力、更年期障碍等有较好效果。[0003]《中国药典》2005版中缺乏对油菜花粉酶解肽类成分的提取办法的记载，而文献报道提取油菜花粉酶解肽方法则丰要为醇提法和水提法。[0004]《华中农业大学》2007油菜花粉谷蛋白酶解肽的制备及其抗肿瘤活性研究,《中国农业科学院》2007油菜蜂花粉中活性肽的制备及其抗氧化性的研究论文中，优选出60℃下，50％乙醇提取三次，每次2h的提取工艺。虽然其提取温度比较低，但是提取时间长，一共需要提取6个小时，能耗大，提取效率低。[0005]《华中农业大学》2007油菜花粉谷蛋白酶解肽的制备及其抗肿瘤活性研究,《中国农业科学院》2007油菜蜂花粉中活性肽的制备及其抗氧化性的研究中，优选出了一种醇提方法，是用5-10目药材，加10倍量80％乙醇，回