中药材及其制剂的显微鉴别操作规程.doc

ＸＸＸＸ制药股份有限公司
标准操作规程
标题：中药材及其制剂显微鉴定法
生效日期年月日页次：1/10编号：SOP－QC－058－01颁发部门：质量管理部新订□修订□原文件号：编制：部门审核：QA审核：批准：
分发部门：QC。
目的：建立中药材及制剂显微鉴定方法操作规程。
范围：所有购进的中药材及正式生产的含原药粉的制剂品种。
责任者：QC主任、检验员对本SOP的实施负责。
规程：
1.药材及成方制剂显微鉴定法是应用动植物细胞、组织和矿物晶体光学等知识鉴别中药材或中成药的一种方法。通常是借助显微镜进行观察，故称“显微鉴别法”主要适用于：
1.1.药材性状鉴别特征不明显或外形相似而组织构造不同；
1.2.药材破碎不易辨别或区分；
1.3.药材呈粉末状态或为成方制剂；
1.4.用显微方法确定药材中有效成份在组织中的分布状况及其特征。
2.显微标本片的分类
2.1.临时性制片操作简单，制作方便，主要用于药材检验。
2.1.1.切制片采用滑走切片或徒手切片法制片。适用于植物根、茎类药材的鉴别。
2.1.2.表面片采用剪、撕等方法制片。适用于叶类、花类及全草类药材的叶片、花冠、萼片、苞片等的鉴别。
2.1.3.解离组织片用适当的组织解离液使组织细胞相互适度解离后装片，适用于观察比较坚硬的细胞组织，如导管、纤维、石细胞等的形态。
2.1.4.磨制片适用于矿物药或有些坚硬的动物类药材如珍珠、石决明及动物骨骼的鉴别。
2.1.5.粉末片适用于花粉粒、孢子等的形态特征或构造观察。
2.2.石蜡片亦称永久片制成的石蜡切片外形较完整，厚薄均匀，且可制得连续切片，观察方便，能长期保存。适用于药材鉴定研究工作。以上各临时装片均可按规定和制备方法制成永久性的石蜡切片。
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3.仪器和用具
3.1.仪器生物光学显微镜、镜台测微尺、离心机。
3.2.用具
3.2.1.放大镜、刀片、解剖刀、镊子、剪、解剖针。
3.2.2.载玻片、盖玻片。
3.2.3.吸湿器、培养皿或小烧杯、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒、乳钵、量筒等。
3.2.4.毛笔、铅笔、带盖搪瓷盘、纱布、吸水纸、火柴等。
4.试液及配制
4.1.水合氯醛试液取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。此液为透化剂，可使干缩的细胞壁膨胀而透明，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质及挥发油。
4.2.甘油醋酸试液（斯氏液）取甘油、50%醋酸与水各等份，混合即得。
此液专用于观察淀粉粒形态，可使淀粉粒不膨胀变形，便于测量其大小。
4.3.甘油－乙醇液取甘油1份，50％乙醇1份，混合即得。
此液为封藏液，用于保存植物配料及临时切片，有软化组织的作用。
4.4.苏丹Ⅲ试液取苏丹Ⅲ0.01g，加90％乙醇5ml溶解后，加甘油5ml摇匀即得。本液应置棕色玻璃瓶内保存，在2个月内应用。
4.5.钌红试液取10％醋酸钠溶液1－2ml，加钌红适量使呈酒红色即得，本液应临用时新配。
4.6.间苯三酚试液取间苯三酚1g，加90％乙醇100ml，使溶解，滤过即得。应置棕色玻璃瓶内，在暗处保存。此液与浓盐酸合用，可使木化细胞染成红色或紫红色。
4.7.碘试液取碘化钾0.5g，溶于少量水中，加碘1g，使溶解加水至100ml即得。
4.8.硝酸铬试液取硝酸铬10ml，加入100ml水中，混匀。另取铬酸10g，加水100ml使溶解。用时二液等份混合，即得。此液为常用的“植物组织解离液”。检品的解离浸泡时间，依材料的质地不同而异。
4.9.α－萘酚试液取15％的α－萘酚乙醇溶液10.5ml，缓缓加入硫酸6.5ml，混匀后再加乙醇40.5ml及水4ml，混匀即得。
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4.10.硝酸汞试液（米隆氏试液）取汞4.5g，加发烟硝酸3ml，待作用完毕，加等量水稀释即得。本液应置棕色玻璃塞瓶内，在暗处保存。用于检查糊粉粒，染成砖红色。
4.11.氯化锌碘试液取碘化钾8g，加入8.5ml水使溶解，再加无水氯化锌2.5g使溶解，加碘适量至饱和，即得。本液应置棕色玻璃瓶塞内。用于检查木质化与纤维素细胞壁，前者显黄棕色，后者显蓝色或紫色。
5.显微标本片的制做
5.1.切片（横片或纵片）
5.1.1.药材的预处理先将药材表面泥沙刷洗干净，将应观察的部位，切成大小适当的块或段，一般以宽1cm，长3cm为宜，厚10~20μm，切面削平整。质地软硬适中的药材可直接进行切片。质地坚硬的则须先使其软化后再切片。软化方法可放在吸湿器（即干燥器底部盛蒸馏水并滴数滴苯酚防霉，上部瓷板上置药材样品吸湿）中闷润，或在水中浸软。有些根、根茎、茎