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骨骼肌发育中miR-145a功能与qPCR内参基因的研究的综述报告
骨骼肌发育是成年人体内最主要的肌肉组织之一，它的发育受很多因素的影响，其中包括基因表达调节。miRNA(microRNA)是一类长约22nt的小分子RNA，具有负调节基因表达的作用。它们可以通过特异性结合靶基因的3'UTR区域，抑制靶基因的mRNA翻译或降解。
miR-145a是一种在哺乳动物中广泛表达的miRNA，并已在骨骼肌发育中被发现对于肌肉细胞分化和肌肉细胞形态的调节作用。miR-145a的表达在肌肉组织中较高，并在发育过程中逐渐上调，提示其在骨骼肌发育中的重要作用。
qPCR(定量PCR)是一种准确测定RNA或DNA浓度的技术，在miRNA研究中应用较为广泛。在qPCR分析中，需要选择内参基因（或称为参比基因）进行标准化。内参基因是稳定的、常见表达的基因，在样品和不同实验中具有恒定的表达量。适当的内参基因会提高qPCR结果的准确性和可靠性。
本文将阐述miR-145a在骨骼肌发育中的功能以及在qPCR分析中合适的内参基因选择。
一、miR-145a在骨骼肌发育中的功能
miR-145a在骨骼肌发育过程中发挥着关键的调节作用。一些研究表明，miR-145a的表达在肌肉组织中逐渐上调，并且在肌肉分化过程中是必需的。与此相对应的，miR-145a的缺失会导致肌肉增生和分化受到严重影响。
通过模拟实验，一些研究者发现，miR-145a与一些转录因子如MyoD、Myogenin、MRF4等有密切的联系。这些转录因子是调节肌肉细胞分化的关键因子，因此miR-145a在肌肉分化过程中的重要性得到了进一步证实。
另外，miR-145a还对肌肉细胞形态的调节起着作用。有人发现，miR-145a抑制了肌肉细胞中非肌肉类基因的表达，并促进了肌肉细胞的形态发育，提示其在肌肉形态建立中的重要作用。
总之，miR-145a在骨骼肌发育中发挥着关键的作用，调节肌肉细胞分化和形态建立。
二、qPCR内参基因的合适选择
在qPCR分析中，选择合适的内参基因进行标准化是至关重要的。一个适当的内参基因应该在样品和不同实验中具有稳定的表达量，避免实验误差的产生。
常用的内参基因包括GAPDH、β-actin、18SrRNA等，但是这些内参基因的选择需要注意一些问题。
1.检测内参基因呈现的稳定表达
qPCR分析开始前，需要对内参基因进行筛选和验证。最好使用多个潜在的内参基因，如β-actin和18SrRNA等，确保你选择的内参基因在每个样品中都表现出恒定的表达水平。可使用专业软件进行分析，得到不同内参基因的表达稳定性，选择序列表达量稳定的内参基因。
2.考虑实验设计的不同组别
如果实验中存在多个不同的组别，如不同从骨骼肌中分离出的肌肉样本，需要考虑不同组别使用不同的内参基因。
3.对样品来源进行分析
不同样品来源的选择会对内参基因的表达量产生影响。例如，不同组织的基因表达量有可能不同，使用相同的内参基因可能会影响结果准确性。因此，选择特定于样品来源的内参基因应该是考虑的因素之一。
4.选择多个合适的内参基因
单一的内参基因可能无法足够准确地反映不同实验组间或不同样品间的基因表达量差异。选择多个合适的内参基因进行标准化，将可以大大提高结果的准确性。
总之，选择合适的内参基因进行qPCR分析是至关重要的。在选择内参基因时，需要考虑实验的不同组别、样品来源和不同候选内参基因的表达稳定性。