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人类巴氏小体的观察实验目的(一)实验原理剂量补偿效应剂量补偿存在两种情况: 雌性哺乳动物一条X染色体异染色质化(失活),只有一条X染色体具有活性,使雌雄动物虽然X染色体数目不同但基因产物的剂量是平衡的; 另一种是X染色质的转录速率不同,如果蝇雌性细胞中两条X染色体都有活性,但它们的转录速率低于雄性细胞X染色体的转录速率。1949年Barr等在雌猫的神经元细胞中发现一种浓缩小体,而雄猫无。而且在其他物种的雌性个体组织细胞核中都有。因此X染色质又称Barr小体。1955年,Barr在女性的口腔细胞中发现Barrbody。 1959年,人们把性染色体异常造成的畸形与巴氏小体的研究联系起来; 1971年,Barrbody命名为X染色质; 食道癌病人巴氏小体出现率低于10%; 正常人细胞出现率为20-45%莱昂假说(Lyonhypothesis)Xinactivationandthetortoiseshellcat巴氏小体在细胞周期中比有活性的X染色体复制晚 X染色质的失活只是部分失活,仍然有部分基因具有转录活性,目前已知的大约有十几个基因有活性。 若失活X染色质为完全失活,则XXY(Klinefelter’ssyndrome)及XO(Turner’ssyndrome)型应表现正常。 Barr小体的数目=n-1(n为X染色体数目) 正常女人的体细胞间期核中Barr小体为1;正常男人的体细胞间期核中Barr小体为0;XXX女人的体细胞间期核中Barr小体为2;XXXX女人的体细胞间期核中Barr小体为3.核膜巴氏小体鉴别特征(二)实验材料(三)实验步骤2.发根毛囊细胞Barr氏小体显色方法 取带有发根的头发,长2—3cm,围绕发根部的1圈长2—3mm的白色物体,即是毛囊细胞团,将其放置于载片上。在毛囊细胞处滴加一滴45%的冰醋酸。酸解5分钟,可使毛囊细胞得到充分软化。以清水冲洗2-3遍。拿起上述发根的梢部,将其上毛囊细胞轻轻蹭于另一干净载片上即可达到转移的目的。 若用刀片或镊子将毛囊细胞刮下,可造成细胞的堆积,同样会出现多层细胞的现象。另外,1根发根的毛囊细胞可以转移到3—4张载片上,以达到充分利用实验材料的目的。观察时又可以看到清晰的单层涂布细胞,便于观察统计。 滴加1滴硫堇染液于待测细胞上,注意染液不可过多,以免细胞流失。约10min后,加盖玻片即可进行观察。X染色质的识别方法:一般位于核膜内侧缘,形状多样,多为半圆形,三角形。可计数细胞的标准: a:核较大,轮廓清除完整,无缺损、皱褶,染色清晰。 b:核质呈细网状或均匀的细颗粒状,无深染大颗粒及细菌污染实验报告

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