宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106770780A(43)申请公布日2017.05.31(21)申请号201611257986.6(22)申请日2016.12.30(71)申请人广州市宜健医学技术发展有限公司地址510635广东省广州市高新技术产业开发区香山路17号办公楼602-603房申请人焦红(72)发明人焦红胡烨敏刘笑笑(74)专利代理机构广州三环专利代理有限公司44202代理人宋静娜郝传鑫(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图1页(54)发明名称宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法(57)摘要本发明公开了一种检测方法，具体涉及一种宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法。本发明宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法包括以下步骤：(1)样品处理：用混合溶剂提取宝乐果原料或含宝乐果的制品中的活性物质，所述混合溶剂由甲醇和水组成；(2)采用HPLC-MS/MS进行定量分析：采用HPLC-MS/MS分别测定宝乐果标准溶液和步骤(1)得到的上样液，将上样液的测定结果与宝乐果标准溶液的测定结果进行比较，对宝乐果原料或含宝乐果的制品中的活性物质进行定性或定量。本发明采用特定的混合溶剂提取宝乐果原料或含宝乐果的制品中的活性物质，提取效率较高；同时，本发明通过HPLC-MS/MS进行定性/定量分析，分离效果好，且检出限和定量限较低。CN106770780ACN106770780A权利要求书1/2页1.一种宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)样品处理：按照每1克样品中加入8～12mL混合溶剂的比例，向样品中加入混合溶剂，溶解样品；其中，所述样品为宝乐果原料或含宝乐果的制品，所述混合溶剂由甲醇和水组成，所述混合溶剂中甲醇的体积百分比为40～80％；当样品为宝乐果原料时，溶解样品后，进行加热处理，冷却后再进行离心或用滤纸过滤，取上清液或滤液，用滤膜过滤，得到上样液；当样品为含宝乐果的制品时，溶解样品后，用滤膜过滤，得到上样液；(2)采用HPLC-MS/MS进行分析：采用HPLC-MS/MS分别测定宝乐果标准溶液和步骤(1)得到的上样液，将上样液的测定结果与宝乐果标准溶液的测定结果进行比较，对样品中的活性物质进行定性或定量；HPLC-MS/MS进行分析时，HPLC的条件为：色谱柱为C18柱；流动相由水相和有机相组成，所述水相与有机相的体积比为2:3～3:2；且所述水相为高纯水，所述有机相由甲醇和甲酸组成，所述甲酸与甲醇的体积比为0.1％；在流速为0.3～0.5mL/min的条件下进行等度洗脱；HPLC-MS/MS进行分析时，质谱检测的条件为：离子源为电喷雾离子源，检测器为三重四级杆串联质谱检测器。2.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，按照每1克样品中加入10mL混合溶剂的比例，向样品中加入混合溶剂。3.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，混合溶剂中甲醇的体积百分比为50％。4.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，当样品为宝乐果原料时，溶解样品后，于60-70℃水浴中加热20-30分钟。5.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，用孔径为0.22μm的滤膜过滤。6.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中，色谱柱的规格为150×4.6mm，粒径为4μm。7.如权利要求1或6所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中，水相与有机相的体积比为1:1，在流速为0.4mL/min的条件下进行等度洗脱；优选地，所述等度洗脱的时间为5-10分钟。8.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中，离子化温度为450～550℃；质谱检测时，采用多反应监测模式和负离子化模式扫描；优选地，所述步骤(2)中，质谱检测时，电喷雾离子源的温度为500℃，特征离子的质荷比为382.00和181.00。9.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述宝乐果原料为宝乐果浓缩液、宝乐果浓缩粉或宝乐果原果酱；所述含宝乐果的制品为含宝乐果的食品、保健品、化妆品或清洁液。2CN106770780A权利要求书2/2页10.如权利要求1所述的宝乐果原料或含宝乐果的制品中活性物质的检测方法，其特征在于：所述方法的检出限