中药化学专题知识专家讲座.pptx

中药化学第二节中药有效成份提取分离方法提取前先判定药材和查阅文件，提取时将药材粉碎成粗粉，惯用提取方法有：溶剂提取法水蒸汽蒸馏法超临界流体萃取法其它方法：（升华法、组织破碎法、压榨法、超声法、微波提取法等）（一）溶剂提取法（2）惯用溶剂特点氯仿（相对密度1.48g/cm3）比水重，沸点61.7℃，易挥发。石油醚，苯，二氯甲烷，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇均与水互不相溶（分层）。丙酮，乙醇，甲醇、乙腈、乙酸与水任意百分比混溶。水：冷水：发生酶解反应，杂质多；热水：效率高，挥发性成份损失，热敏性成份易破坏。（3）溶剂要求二、分离精制方法1、酸碱溶剂法对酸性、碱性或两性成份，调整溶液pH值，改变分子存在状态（游离型或离解型），改变溶解度，从而实现分离。生物碱类成份惯用酸水提取后，调至碱性，从水中沉淀析出（酸/碱法）；黄酮、醌类或酚类等酸性成份惯用碱水提取后，调至酸性，从水中沉淀析出（碱/酸法）；蛋白质提取后调整PH至等电点使其沉淀析出。pH对于酸性成份：HA+H2O↔A-+H3+OpH=pKa+lg[A-]/[HA]若使酸性物质完全离解，则pH=pKa+lg[A-]/[HA]≈pKa+lg(100/1)pH≥pKa+2，酸性物质多呈离解态（90％A-）；若使酸性物质完全游离，则pH=pKa+lg[A-]/[HA]≈pKa+lg(1/100)pH≤pKa-2，酸性物质多呈游离态（90％HA）。讨论：已知酚类化合物pKa9.2~10.8；羧酸类化合物pKa5，怎样调整pH值，改变酚类和羧酸存在状态？pH对于碱性成份：B+H2O↔BH++OH-BH++H2O↔B+H3+OpH=pKa+lg[B]/[BH+]若使碱性物质完全离解，则pH=pKa+lg[B]/[BH+]≈pKa+lg(1/100)pH≤pKa-2，碱性物质呈离解态（>90％BH＋）；若使碱性物质完全游离，则pH=pKa+lg[B]/[BH+]≈pKa+lg(100/1)pH≥pKa+2，碱性物质呈游离态（>90％B）。小结：pH<3时，酸性物质多呈游离状态（HA），而碱性物质多呈离解状态（BH+）。；pH>12时，酸性物质多呈离解状态（A-），而碱性物质多呈游离状态（B）。分配系数（K值，即分配比）即在一定温度及压力下，溶质在两相溶剂中浓度比（K=CU/CL），为一常数。萃取时假如各成份在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高。极性较大成份：正丁醇－水极性中等成份：乙酸乙酯醇－水极性较小成份：乙醚（或乙酸乙酯）－水系统溶剂萃取法逆流分溶法（CCD）使流动相垂直上升或下降，经过固定相液柱，实现物质逆流色谱分离。优点：1）不需振荡两相溶剂，尤其适于皂苷类成份分离；2）不需固体载体，样品无吸附消耗，无污染，无脱尾现象，且能够定量回收。缺点：1）必须选取能生成液滴溶剂系统；2）处理样品量小；3）要有特定设备，操作较繁琐。优点：1）不需固体载体；2）样品无吸附消耗，无污染，无脱尾现象，且能够定量回收。适合用于皂苷、生物碱、酸性成份、蛋白质、糖类分离精制。缺点：1）需要特定设备；2）处理样品量小。（二）沉淀法膜分离技术类型：应用：－物理吸附也叫表面吸附，由分子间作用力引发，遵照“相同者易于吸附”原理。（1）基本特点：无选择性、可逆、快速吸附（2）基本要素：溶剂、溶质、吸附剂－常见吸附剂硅胶：显微酸性，适于分离酸性和中性化合物，若分离生物碱时需在流动相中加入适量有机碱；氧化铝：呈碱性，适于分离生物碱等碱性成份，不宜用于分离有机酸、酚性等酸性成份。活性炭非极性吸附剂，对非极性溶质含有较强亲和力，在水中对溶质吸附能力强；溶剂极性越小，洗脱能力越强。反之，越弱。聚酰胺原理：聚酰胺经过分子中酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物酚羟基，或酰胺键上游离胺基与醌类、脂肪酸上羰基形成氢键缔合而产生吸附。特点：聚酰胺不溶于水及有机溶剂，对碱稳定，但可溶于浓盐酸、冰醋酸及甲酸。极性与非极性成份均可适用；尤其适合分离酚类、醌类、黄酮类化合物；聚酰胺对鞣质吸附特强，近乎不可逆，可用于粗提物脱鞣处理。洗脱规律或出柱次序：常见凝胶种类2）羟丙基葡聚糖凝胶SephadexLH-20系列为SephadexG-25经羟丙基化后产物，应用较广。含有分子筛特征，可按分子量大小分离物质；在由极性与非极性溶剂组成混合溶剂中经常起到反相分配色谱作用，适合于不一样类型有机物分离。SephadexLH-20即能在水中，也能在有机溶剂中或者含水混合溶剂中应用。（4）应用广泛应用于黄酮类、苷类、生物碱、蛋白、多糖等成份纯化。比如葡聚糖凝胶G和LH-20分离黄酮苷元时，主要靠吸附作用，苷元酚羟基越多，越难洗脱；分离黄酮苷时，主要靠分子筛作用。②反相分配柱色谱特点：固定相极性<流动相极性支持剂：硅胶、硅藻土、纤维素粉等固定相：石蜡油等弱极性溶剂流动