201610209491X稀土铥元素掺杂的蓝色上转化纳米基因载体的制备方法及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN105861549B
(45)授权公告日2019.12.10
(21)申请号201610209491.X(56)对比文件
(22)申请日2016.04.05CN105251005A,2016.01.20,
CN104721821A,2015.06.24,
(65)同一申请的已公布的文献号CN105176515A,2015.12.23,
申请公布号CN105861549ACN103571470A,2014.02.12,
(43)申请公布日2016.08.17CN105251005A,2016.01.20,
(73)专利权人天津大学何璐.多层双聚合物修饰的稀土上转换发光
地址300072天津市南开区卫津路92号天纳米材料用于多模态成像及血清存在下提高转
津大学染的研究《.中国优秀硕士学位论文全文数据库
医药卫生科技辑》.2015,
(72)发明人常津郑斌王汉杰谌红彬卢耀勇等.纳米金-聚乙烯亚胺基因载体的
潘慧卓制备《.现代生物医学进展》.2014,第13卷(第20
(74)专利代理机构天津市北洋有限责任专利代期),
理事务所12201卢耀勇等.纳米金-聚乙烯亚胺基因载体的
代理人王丽制备《.现代生物医学进展》.2014,第13卷(第20
(51)Int.Cl.期),
C12N15/85(2006.01)审查员田颖

权利要求书2页说明书7页附图1页
(54)发明名称
稀土铥元素掺杂的蓝色上转化纳米基因载
体的制备方法及应用
(57)摘要
本发明涉及稀土铥元素掺杂的蓝色上转换
纳米基因载体的制备方法及应用。包括：1)稀土
铥元素掺杂的蓝色稀土上转换纳米颗粒的制备：
蓝色上转换纳米颗粒采用溶剂热法制备，制得的
直径为20～50纳米；2)采用配体交换法制备水溶
性羧基化稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米颗
粒；3)稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米颗粒表
面连接分子量为600的聚醚酰亚胺。本发明实时
跟踪外源基因的稀土铥元素掺杂的蓝色上转换
基因纳米载体的基因纳米载体的基因转染效率
为40～70％，细胞存活率为80％～95％。本载体
还可以通过在980纳米近红外光的照射，检测蓝
色上转换的位置来实时跟踪基因所到达的目的
位置。
CN105861549B
CN105861549B权利要求书1/2页

1.一种稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米基因载体的制备方法；其特征是步骤如下：
1)稀土铥元素掺杂的蓝色稀土上转换纳米颗粒的制备：蓝色上转换纳米颗粒采用溶剂
热法制备，制得的直径为20～50纳米；
2)采用配体交换法制备水溶性羧基化稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米颗粒；
3)稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米颗粒表面连接分子量为600的聚醚酰亚胺；步骤
如下：
将水溶性蓝色上转换纳米颗粒溶解至2～3毫升的去离子水中并转移至玻璃瓶中，然后
加入75～100微升、相对分子质量为600的聚醚酰亚胺，并于15～20℃加热，300～400转/分
钟磁力条件下，搅拌反应10～12小时，然后以12,000～13,000转/分钟，离心8～10分钟，得
到表面吸附有聚醚酰亚胺的蓝色上转换纳米颗粒；
将上述沉淀全部加入去离子水中，并按照质量份数比碳二亚胺：N-羟基琥珀酰亚胺＝
0.5:0.5～1，继续搅拌3～4小时后离心纯化，制得吸附DNA的蓝色上转换基因纳米载体。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是所述的步骤1)稀土铥元素掺杂的蓝色上转
换纳米载体颗粒的制备方法步骤如下：

1)稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米颗粒采用溶剂热法制得：将450毫克YCl3·6H2O,

200毫克YbCl3·6H2O和1毫克～3毫克TmCl3·6H2O溶解至1～2毫升去离子水中，于300～400
转/分钟磁力搅拌条件下，加热至100～120℃直至稀土盐溶液变成白色固体；
2)待水份蒸干后，关闭加热并冷却至50～60℃，加入4～6毫升油酸及8～12毫升十八
烯，并升温至120～140℃使盐溶液完全溶解；
3)冷却至50～60℃，加入溶有50～60毫克氢氧化钠和100～150毫克氟化铵的5毫升甲
醇溶液；升温至110～120℃，采用油泵抽真空30～40分钟；
4)通入氩气，升温到310～320℃，在300～400转/分钟磁力条件下，搅拌反应50～60分
钟；
5)待反应结束后加入丙酮离心纯化，得到蓝色上转换纳米颗粒。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征是所述的步骤2)采用配体交换法制备水溶性
羧基化稀土铥元素掺杂的蓝色上转换纳米颗粒，具体步骤如下：
1)取蓝色上转换纳米颗粒8～10毫克溶解至1.25毫升的二氯苯中并转移至玻璃瓶中，
然后加入等体积的N，N-二甲基甲酰胺，以90～100W的功率超声混匀；
2)称