CN2021113635648一种人血白蛋白的纯化方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN113831405A
(43)申请公布日2021.12.24
(21)申请号202111363564.8
(22)申请日2021.11.17
(71)申请人华兰生物工程重庆有限公司
地址408000重庆市涪陵区鹤凤大道66号
(72)发明人刘余江张宝献滕世超李凯旋
彭建
(74)专利代理机构重庆强大凯创专利代理事务
所(普通合伙)50217
代理人陈雍
(51)Int.Cl.
C07K14/765(2006.01)
C07K1/34(2006.01)
C07K1/18(2006.01)
C07K1/36(2006.01)

权利要求书2页说明书10页附图5页
(54)发明名称
一种人血白蛋白的纯化方法
(57)摘要
本发明涉及人血白蛋白制备技术领域，具体
涉及一种人血白蛋白的纯化方法，包括以下依次
进行的步骤：S1：原料血浆经过乙醇沉淀处理获
得含有组分V的滤液；S2：所述滤液依次经过超滤
和巴氏灭活后，获得蛋白制品B；S3：对蛋白制品B
依次进行阴离子交换层析和阳离子交换层析，或
者对蛋白制品B依次进行阳离子交换层析和阴离
子交换层析，获得层析后制品；S4对层析后制品
进行超滤处理，获得蛋白制品C。本方案可以解决
经巴氏灭活的人血白蛋白制品中的多聚体难以
充分去除的技术问题，以提升人血白蛋白制品的
质量、有效性以及安全性，并同时保证人血白蛋
白的提取纯化效率。
CN113831405A
CN113831405A权利要求书1/2页

1.一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：包括以下依次进行的步骤：
S1获取含有人血白蛋白的滤液；
S2第一次超滤和第一次巴氏灭活：所述滤液依次经过超滤和巴氏灭活后，获得蛋白制
品B；
S3离子交换层析：对蛋白制品B依次进行阴离子交换层析和阳离子交换层析，或者对蛋
白制品B依次进行阳离子交换层析和阴离子交换层析，获得层析后制品；
S4第二次超滤：对层析后制品进行超滤处理，获得蛋白制品C。
2.根据权利要求1所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：还包括S5第二次巴
氏灭活：对蛋白制品C进行巴氏灭活，获得蛋白制品D。
3.根据权利要求2所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S3中，阴离子交
换层析的填料为Q、TMAE或DEAE。
4.根据权利要求3所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S3中，阳离子交
换层析的填料为SP。
5.根据权利要求4所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S3中，当对蛋白
制品B依次进行阴离子交换层析和阳离子交换层析时，调整蛋白制品B的pH值为4.40～
5.00，电导率≤2.5mS/cm，蛋白质浓度≤100g/L；将调整后的蛋白制品B以≤3.0cm/min的流
速上样于阴离子交换层析柱，收集流穿液A；调整流穿液A的pH值为5.10～5.50，电导率为
2.0～6.0mS/cm；将调整后的流穿液A以≤3.0cm/min的流速上样于阳离子交换层析柱，收集
流穿液B。
6.根据权利要求5所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S3中，当对蛋白
制品B依次进行阴离子交换层析和阳离子交换层析时，调整蛋白制品B的pH值为4.60～
4.80，电导率为1.0～1.5mS/cm，蛋白质浓度≤100g/L；将调整后的蛋白制品B以≤3.0cm/
min的流速上样于阴离子交换层析柱，收集流穿液A；调整流穿液A的pH值为5.10～5.50，电
导率为4.0～6.0mS/cm；将调整后的流穿液A以≤3.0cm/min的流速上样于阳离子交换层析
柱，收集流穿液B。
7.根据权利要求4所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S3中，对蛋白制
品B依次进行阳离子交换层析和阴离子交换层析时，调整蛋白制品B的pH值为5.10～5.50，
电导率为2.0～6.0mS/cm，蛋白质浓度≤100g/L；将调整后的蛋白制品B以≤3.0cm/min的流
速上样于样离子交换层析柱，收集流穿液B；调整流穿液B的pH值为4.40～5.00，电导率为
1.0～1.5mS/cm；将调整后的流穿液B以≤3.0cm/min的流速上样于阳离子交换层析柱，收集
流穿液A。
8.根据权利要求2所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S2和S5中，巴氏
灭活的条件为恒温60.0±0.5℃持续10h。
9.根据权利要求2所述的一种人血白蛋白的纯化方法，其特征在于：在S2中，所述滤液
依次经过浓缩、等体积超滤处理后，进行蛋白制品A的配制；蛋白制品A中的蛋白浓度为
10wt.％～25wt.％，pH值为6.40～7.40；蛋白制品A中含有氯化钠和辛酸钠，氯化钠的终浓
度为60～100mmol/L，辛酸钠的添加量为每