2021108817129一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法.pdf

(19)国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN113711911B
(45)授权公告日2022.11.25
(21)申请号202110881712.9审查员裴荣杰

(22)申请日2021.08.02
(65)同一申请的已公布的文献号
申请公布号CN113711911A
(43)申请公布日2021.11.30
(73)专利权人四川协力制药股份有限公司
地址611930四川省成都市彭州市天彭镇
牡丹大道中段588号
(72)发明人林良科王旭东
(74)专利代理机构成都创新引擎知识产权代理
有限公司51249
专利代理师柴越
(51)Int.Cl.
A01H4/00(2006.01)
权利要求书1页说明书10页附图1页
(54)发明名称
一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增
殖的方法
(57)摘要
本发明属于药用植物组织培养技术领域，尤
其涉及一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速
增殖的方法，包括如下步骤：1)采集淫羊藿幼嫩
根状茎，去掉叶片，用洗衣粉饱和溶液浸泡
30min，并用刷子轻轻刷表面，再用流水冲洗2h
后，置于超净工作台上，消毒，用无菌手术剪剪掉
根状茎两端各2mm，得到带完整芽点的无菌茎段，
备用；2)将步骤1)获得的无菌茎段垂直接种到诱
导培养基上培养，诱导出芽；3)将步骤2)获得的
萌蘖芽切为单个芽点，垂直接种到增殖培养基上
培养，得到淫羊藿丛生芽；本发明方法可获得淫
羊藿快速增殖的方法，可为淫羊藿人工繁育提供
优质种苗，解决了淫羊藿因种子采集困难、发芽
率低而育苗困难的难题。
CN113711911B
CN113711911B权利要求书1/1页

1.一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)采集淫羊藿幼嫩根状茎，去掉叶片，用洗衣粉饱和溶液浸泡30min，并用刷子轻轻刷
表面，再用流水冲洗2h后，置于超净工作台上，用体积分数为75％的酒精消毒30s，无菌水冲
洗3次，再消毒，用无菌手术剪剪掉根状茎两端各2mm，得到带完整芽点的无菌茎段，备用；
2)将步骤1)获得的无菌茎段垂直接种到诱导培养基上培养，诱导出芽；所述诱导培养
基为MS+1.5mg/L6‑BA+0.8mg/LIBA+60mg/LPVP+120mg/L链霉素+5.8g/L琼脂+30g/L蔗
糖，调节pH为5.8；
3)将步骤2)获得的萌蘖芽切为单个芽点，垂直接种到增殖培养基上培养，在温度为25
℃、光照强度为2300‑2500lx、光照时长为12h/d条件下培养28d，得到淫羊藿丛生芽；所述增
殖培养基为MS+2.0mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+60mg/LPVP+5.8g/L琼脂+30g/L蔗糖，调节pH
为5.8；
在步骤1)中，所述再消毒的方法为：用质量分数为0.1％升汞消毒4min，无菌水冲洗5
次，再次用质量分数为0.1％升汞消毒2.5min，无菌水冲洗5次；
在步骤2)中，所述培养条件为在25℃条件下暗培养7d，然后将培养基转至25℃、光照强
度2300‑2500lx，光照时长12h/d条件下培养18d。

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CN113711911B说明书1/10页

一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法

技术领域
[0001]本发明属于药用植物组织培养技术领域，尤其涉及一种柔毛淫羊藿无菌体系的建
立及快速增殖的方法。

背景技术
[0002]柔毛淫羊藿为《中华人民共和国药典》(2020年版)淫羊藿收载品种原植物之一，是
我国传统中药材，主要有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效，在我国已有2000多年的应用历史。
现代科研人员在其体内发现总黄酮、多糖、生物碱等多种生理活性的化学成分,目前在传统
医学及现代医学中应用广泛。当前淫羊藿的市场需求量约为5000吨/年,主要的获取方式仍
然为采挖野生资源,随着采挖量增大和人们的无序采挖，野生淫羊藿资源的不断减少，非常
不利于资源的再生和可持续利用。因此人工引种栽培淫羊藿就显得迫在眉睫。
[0003]自然条件下，柔毛淫羊藿种子由于自然休眠及种胚后熟作用，种子萌发率极低且
发芽周期长，非常不利于淫羊藿的规模化种植。现在淫羊藿人工种植基本采用分株繁殖的
方式，长期无性繁殖容易导致品种退化，药材产量、质量下降。

发明内容
[0004]本发明方法可获得淫羊藿无菌体系及快速增殖的方法，可为淫羊藿人工繁育提供
优质种苗，解决了淫羊藿因种子采集困难、发芽率低而育苗困难难题。
[0005]本发明提供了一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法，包括如下步
骤：
[0006]1)采集淫羊藿幼嫩根状茎，去掉叶片，用洗衣粉饱和溶液浸泡30min，并用刷子轻
轻刷表面，再用流水冲洗2h后，置于超净工作台上，用体积分数为75％的酒精消毒30s，无菌
水冲洗3次，