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2021108817129一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法.pdf

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(19)国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN113711911B
(45)授权公告日2022.11.25
(21)申请号202110881712.9审查员裴荣杰

(22)申请日2021.08.02
(65)同一申请的已公布的文献号
申请公布号CN113711911A
(43)申请公布日2021.11.30
(73)专利权人四川协力制药股份有限公司
地址611930四川省成都市彭州市天彭镇
牡丹大道中段588号
(72)发明人林良科王旭东
(74)专利代理机构成都创新引擎知识产权代理
有限公司51249
专利代理师柴越
(51)Int.Cl.
A01H4/00(2006.01)
权利要求书1页说明书10页附图1页
(54)发明名称
一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增
殖的方法
(57)摘要
本发明属于药用植物组织培养技术领域,尤
其涉及一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速
增殖的方法,包括如下步骤:1)采集淫羊藿幼嫩
根状茎,去掉叶片,用洗衣粉饱和溶液浸泡
30min,并用刷子轻轻刷表面,再用流水冲洗2h
后,置于超净工作台上,消毒,用无菌手术剪剪掉
根状茎两端各2mm,得到带完整芽点的无菌茎段,
备用;2)将步骤1)获得的无菌茎段垂直接种到诱
导培养基上培养,诱导出芽;3)将步骤2)获得的
萌蘖芽切为单个芽点,垂直接种到增殖培养基上
培养,得到淫羊藿丛生芽;本发明方法可获得淫
羊藿快速增殖的方法,可为淫羊藿人工繁育提供
优质种苗,解决了淫羊藿因种子采集困难、发芽
率低而育苗困难的难题。
CN113711911B
CN113711911B权利要求书1/1页

1.一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)采集淫羊藿幼嫩根状茎,去掉叶片,用洗衣粉饱和溶液浸泡30min,并用刷子轻轻刷
表面,再用流水冲洗2h后,置于超净工作台上,用体积分数为75%的酒精消毒30s,无菌水冲
洗3次,再消毒,用无菌手术剪剪掉根状茎两端各2mm,得到带完整芽点的无菌茎段,备用;
2)将步骤1)获得的无菌茎段垂直接种到诱导培养基上培养,诱导出芽;所述诱导培养
基为MS+1.5mg/L6‑BA+0.8mg/LIBA+60mg/LPVP+120mg/L链霉素+5.8g/L琼脂+30g/L蔗
糖,调节pH为5.8;
3)将步骤2)获得的萌蘖芽切为单个芽点,垂直接种到增殖培养基上培养,在温度为25
℃、光照强度为2300‑2500lx、光照时长为12h/d条件下培养28d,得到淫羊藿丛生芽;所述增
殖培养基为MS+2.0mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+60mg/LPVP+5.8g/L琼脂+30g/L蔗糖,调节pH
为5.8;
在步骤1)中,所述再消毒的方法为:用质量分数为0.1%升汞消毒4min,无菌水冲洗5
次,再次用质量分数为0.1%升汞消毒2.5min,无菌水冲洗5次;
在步骤2)中,所述培养条件为在25℃条件下暗培养7d,然后将培养基转至25℃、光照强
度2300‑2500lx,光照时长12h/d条件下培养18d。


2
CN113711911B说明书1/10页

一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法

技术领域
[0001]本发明属于药用植物组织培养技术领域,尤其涉及一种柔毛淫羊藿无菌体系的建
立及快速增殖的方法。

背景技术
[0002]柔毛淫羊藿为《中华人民共和国药典》(2020年版)淫羊藿收载品种原植物之一,是
我国传统中药材,主要有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效,在我国已有2000多年的应用历史。
现代科研人员在其体内发现总黄酮、多糖、生物碱等多种生理活性的化学成分,目前在传统
医学及现代医学中应用广泛。当前淫羊藿的市场需求量约为5000吨/年,主要的获取方式仍
然为采挖野生资源,随着采挖量增大和人们的无序采挖,野生淫羊藿资源的不断减少,非常
不利于资源的再生和可持续利用。因此人工引种栽培淫羊藿就显得迫在眉睫。
[0003]自然条件下,柔毛淫羊藿种子由于自然休眠及种胚后熟作用,种子萌发率极低且
发芽周期长,非常不利于淫羊藿的规模化种植。现在淫羊藿人工种植基本采用分株繁殖的
方式,长期无性繁殖容易导致品种退化,药材产量、质量下降。

发明内容
[0004]本发明方法可获得淫羊藿无菌体系及快速增殖的方法,可为淫羊藿人工繁育提供
优质种苗,解决了淫羊藿因种子采集困难、发芽率低而育苗困难难题。
[0005]本发明提供了一种柔毛淫羊藿无菌体系的建立及快速增殖的方法,包括如下步
骤:
[0006]1)采集淫羊藿幼嫩根状茎,去掉叶片,用洗衣粉饱和溶液浸泡30min,并用刷子轻
轻刷表面,再用流水冲洗2h后,置于超净工作台上,用体积分数为75%的酒精消毒30s,无菌
水冲洗3次,
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