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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号CN107384805B (45)授权公告日2020.12.29 (21)申请号201710741572.9(56)对比文件 (22)申请日2017.08.25CN106489524A,2017.03.15 CN106367352A,2017.02.01 (65)同一申请的已公布的文献号CN105255744A,2016.01.20 申请公布号CN107384805ACN104488557A,2015.04.08 (43)申请公布日2017.11.24赵兰叶等.如何提纯复壮平菇菌种《.河北农 (73)专利权人山西农业大学业》.2013,(第215期), 地址030801山西省晋中市太谷县铭贤南审查员张艳青 路兴农街1号 (72)发明人刘靖宇常明昌孟俊龙张敏 徐丽婧王术荣耿雪冉 (74)专利代理机构太原华弈知识产权代理事务 所14108 代理人李毅 (51)Int.Cl. C12N1/14(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图6页 (54)发明名称 一种食用菌复壮型菌株的生产方法 (57)摘要 本发明公开了一种食用菌菌株复壮的方法, 包括种菇选择、组织分离、单根菌丝分离、转接复 壮、培养料筛选、出菇验证和生产中试试验。与现 有技术相比,本发明充分利用了食用菌菌丝生长 的生物学特性,以光学显微镜下典型单根菌丝的 细胞分离,结合生产培养基筛选。采用该方法获 得的复壮型菌株生长同步性高,生长速度较复壮 前提高10~20%左右,单位体积菌丝量提高15~ 25%,且出菇潮次更为明显。 CN107384805B CN107384805B权利要求书1/1页 1.一种食用菌菌株复壮的方法,包括如下步骤: (1)种菇选择 复壮型菌株生产用种菇要求菇形理想,长势健壮,无虫无病的子实体,选择器官分化 尚未结束时菌膜与菌柄相连的幼菇,或依据具体食用菌种类的分化特点选择相应生长旺盛 的组织部位; (2)组织分离 将选择的种菇用无菌水冲洗后,用75%的酒精溶液表面消毒,在无菌条件下,采用经火 焰灼烧过的手术刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕开,挑取菌盖与菌柄交界处的直径3-5mm的 组织块,转接于事先制作的母种、直径90mm的无菌培养基培养皿中央,倒置,24℃暗培养5- 7天; (3)单根菌丝分离 将培养好的平板置于在普通正置光学显微镜下,采用10倍目镜,在菌落边缘处,筛选生 物学性状典型,且生长势强的单根菌丝,采用事先灭菌的特制接种针,将挑选的单根菌丝自 距顶端15-20μm处切断,将切下的菌丝片段挑出,转接于母种无菌斜面培养基前端,共计挑 取50-60次,分别转接于事先制作的50-60支母种无菌斜面培养基,并依次编号,斜面向下, 24℃暗培养10-15天; (4)转接复壮 无菌条件下,从(3)制备的母种无菌斜面培养基内的距菌落边缘2-3cm处挑取5-7mm的 菌丝块,分别转接入新的母种、直径90mm的无菌培养基培养皿中央,24℃暗培养8-10天,剔 除菌丝生长势较差的培养皿所对应的试管种; (5)培养料筛选 将保留的菌丝生长势较强的试管种重新编号,剔除菌丝分解基质能力弱的菌株,保留 分解基质能力强的菌株; (6)出菇验证 对保留的菌丝生长势较强的试管种,分别进行菌落形态观察和接种于出菇培养基中进 行出菇实验验证,并测定其农艺学性状与栽培性状,从而获得备选复壮型菌株; (7)生产中试试验 采用出菇培养基对备选复壮型菌株进行较大规模的生产试验,并进行生产性能测定, 从而确定最终的生产用复壮型菌株。 2.根据权利要求1所述的食用菌菌株复壮的方法,其特征在于,所述步骤(4)的菌丝块 包含培养基。 2 CN107384805B说明书1/4页 一种食用菌复壮型菌株的生产方法 技术领域 [0001]本发明涉及食用菌栽培性状和菌种生产领域,具体涉及到食用菌复壮型菌株的筛 选和生产方法。 背景技术 [0002]食用菌被誉为“山珍”,营养、药用价值很高,含有人体不能自身合成的8种必需氨 基酸,特别是真菌多糖、糖肽、三萜类等活性成分,具有抗氧化、延缓衰老、增强免疫力、抑制 肿瘤和抗癌的作用。随着人类对食用菌营养和药用价值认识的提高,消费需求将越来越大。 我国食用菌总产量占世界总产量的70%以上,仅次于粮、菜、果、油位居第5位,已成为我国现 代农业的主导产业之一。 [0003]目前,我国食用菌菌种生产多采用无性繁殖的方式,存在菌株退化严重的问题,随 着我国食用菌产业规模的快速发展,生产用菌株的种性保持工作就显得尤为重要。依据不 同食用菌种类的生物学特征,开展生产用、稳定性高的食用菌复壮型菌株的筛选和生产将 有利于推进我国食用菌产业的转型升级,推动我国食用菌产业尽快走上质量效益型发
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