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(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号CN116183334A (43)申请公布日2023.05.30 (21)申请号202310352825.9 (22)申请日2023.04.04 (71)申请人杭州医学院 地址311399浙江省杭州市临安区锦南街 道颐康街8号 (72)发明人缪云萍 (74)专利代理机构杭州君锐达知识产权代理有 限公司33544 专利代理师应孔月 (51)Int.Cl. G01N1/28(2006.01) G01N1/30(2006.01) 权利要求书1页说明书5页附图2页 (54)发明名称 一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法 (57)摘要 本发明公开了一种大鼠睾丸组织石蜡切片 制作方法,所述方法包括依次执行的大鼠睾丸组 织的取材、固定、清洗、脱水、透明、浸蜡、石蜡包 埋、切片、粘片以及烘干步骤,最终制得睾丸组织 石蜡切片,其中,固定步骤中固定液是Bouin液, 固定时间不超过24h,脱水的时间为13h,透明时 间为15min,浸蜡时间为1.0h,烘片条件为60℃环 境中1h;其中,所述固定液是Bouin液,固定时间 不超过24h,脱水的时间为13h,透明时间为 15min,浸蜡时间为1h,烘片条件为在60℃环境中 1h。本发明提供的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方 法,可以获得较好的睾丸石蜡切片,HE染色效果 佳,在显微镜下,可清晰地观察到大鼠睾丸组织 完整的组织结构和细胞形态。 CN116183334A CN116183334A权利要求书1/1页 1.一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,所述方法包括: 依次执行的大鼠睾丸组织的取材、固定、清洗、脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、切片、粘片 以及烘干步骤,最终制得睾丸组织石蜡切片,其中,固定步骤中固定液是Bouin液,固定时间 不超过24h,脱水的时间为13h,透明时间为15min,浸蜡时间为1.0h,烘片条件为60℃环境中 1h; 其中脱水步骤中,脱水顺序为: 在50%乙醇脱水4h;65%乙醇脱水2h、75%乙醇脱水2h、85%乙醇脱水2h、95%乙醇Ⅰ脱 水1.0h、95%乙醇Ⅱ脱水30min;无水乙醇Ⅰ脱水30min、无水乙醇Ⅱ脱水30min、无水乙醇Ⅲ 脱水30min; 其中浸蜡步骤包括: 大鼠睾丸组织分别在58℃熔点的石蜡溶液Ⅰ浸蜡5min、石蜡溶液Ⅱ浸蜡10min、石蜡溶 液Ⅲ浸蜡15min、石蜡溶液Ⅳ浸蜡30min。 2.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,所述大鼠睾丸组 织进行横切,取材大小为0.5cm×0.5cm×0.3cm。 3.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,对标本进行清 洗,直至洗尽固定液。 4.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,透明步骤包括: 将大鼠睾丸组织分别在二甲苯Ⅰ5min、二甲苯Ⅱ10min中进行透明处理。 5.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,石蜡包埋骤包 括: 将浸蜡后的大鼠睾丸组织用60℃熔点的石蜡溶液包埋,室温凝固,‑20℃保存。 6.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,切片步骤包括: 将蜡块用石蜡切片机先修片,直至看到完整组织再切片,切片厚度为5um/张。 7.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,粘片步骤包括: 将切片放入常温纯净水中展开,待切片展开后,放入48℃的纯净水中展平,用载玻片捞起切 片,完成粘片过程。 8.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法,其特征在于,烘干步骤包括: 将切片置于60℃恒温烘箱内烘片1.0h。 2 CN116183334A说明书1/5页 一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法 技术领域 [0001]本申请涉及病理切片制备技术领域,尤其涉及一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方 法。 背景技术 [0002]组织切片是显微镜下观察正常细胞组织形态结构、判断细胞组织形态变化的主要 材料。细胞组织离开机体后酶失活,细胞快速自溶,组织形态和结构遭破坏。通过石蜡切片 制作技术可以对组织进行固定处理,保持其原有结构。石蜡切片制片是组织学常规制片技 术中较为广泛应用的方法。常规步骤包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、粘片、烘 片、染色及封片。其中固定、脱水、浸蜡条件对制片技术影响较大。 [0003]大鼠是一种常用的实验动物,作为实验载体广泛用于生命医学研究的领域,大鼠 睾丸组织的细胞形态观察是评价药理毒理及药效的重要项目,提供完整的睾丸组织切片是 前提和基础。大鼠睾丸组织体积通常比小鼠大,比家兔小,睾丸组织水分含量不同,曲细精 管排列紧密,细胞层次较多,纤维组织成分和间质细胞数量较少,所以采用常
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