CN2023103528259一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法.pdf

(19)国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN116183334A
(43)申请公布日2023.05.30
(21)申请号202310352825.9
(22)申请日2023.04.04
(71)申请人杭州医学院
地址311399浙江省杭州市临安区锦南街
道颐康街8号
(72)发明人缪云萍
(74)专利代理机构杭州君锐达知识产权代理有
限公司33544
专利代理师应孔月
(51)Int.Cl.
G01N1/28(2006.01)
G01N1/30(2006.01)

权利要求书1页说明书5页附图2页
(54)发明名称
一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法
(57)摘要
本发明公开了一种大鼠睾丸组织石蜡切片
制作方法，所述方法包括依次执行的大鼠睾丸组
织的取材、固定、清洗、脱水、透明、浸蜡、石蜡包
埋、切片、粘片以及烘干步骤，最终制得睾丸组织
石蜡切片，其中，固定步骤中固定液是Bouin液，
固定时间不超过24h，脱水的时间为13h，透明时
间为15min，浸蜡时间为1.0h，烘片条件为60℃环
境中1h；其中，所述固定液是Bouin液，固定时间
不超过24h，脱水的时间为13h，透明时间为
15min，浸蜡时间为1h，烘片条件为在60℃环境中
1h。本发明提供的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方
法，可以获得较好的睾丸石蜡切片，HE染色效果
佳，在显微镜下，可清晰地观察到大鼠睾丸组织
完整的组织结构和细胞形态。
CN116183334A
CN116183334A权利要求书1/1页

1.一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，所述方法包括：
依次执行的大鼠睾丸组织的取材、固定、清洗、脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、切片、粘片
以及烘干步骤，最终制得睾丸组织石蜡切片，其中，固定步骤中固定液是Bouin液，固定时间
不超过24h，脱水的时间为13h，透明时间为15min，浸蜡时间为1.0h，烘片条件为60℃环境中
1h；
其中脱水步骤中，脱水顺序为：
在50％乙醇脱水4h；65％乙醇脱水2h、75％乙醇脱水2h、85％乙醇脱水2h、95％乙醇Ⅰ脱
水1.0h、95％乙醇Ⅱ脱水30min；无水乙醇Ⅰ脱水30min、无水乙醇Ⅱ脱水30min、无水乙醇Ⅲ
脱水30min；
其中浸蜡步骤包括：
大鼠睾丸组织分别在58℃熔点的石蜡溶液Ⅰ浸蜡5min、石蜡溶液Ⅱ浸蜡10min、石蜡溶
液Ⅲ浸蜡15min、石蜡溶液Ⅳ浸蜡30min。
2.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，所述大鼠睾丸组
织进行横切，取材大小为0.5cm×0.5cm×0.3cm。
3.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，对标本进行清
洗，直至洗尽固定液。
4.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，透明步骤包括：
将大鼠睾丸组织分别在二甲苯Ⅰ5min、二甲苯Ⅱ10min中进行透明处理。
5.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，石蜡包埋骤包
括：
将浸蜡后的大鼠睾丸组织用60℃熔点的石蜡溶液包埋，室温凝固，‑20℃保存。
6.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，切片步骤包括：
将蜡块用石蜡切片机先修片，直至看到完整组织再切片，切片厚度为5um/张。
7.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，粘片步骤包括：
将切片放入常温纯净水中展开，待切片展开后，放入48℃的纯净水中展平，用载玻片捞起切
片，完成粘片过程。
8.如权利要求1所述的大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法，其特征在于，烘干步骤包括：
将切片置于60℃恒温烘箱内烘片1.0h。

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CN116183334A说明书1/5页

一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方法

技术领域
[0001]本申请涉及病理切片制备技术领域，尤其涉及一种大鼠睾丸组织石蜡切片制作方
法。

背景技术
[0002]组织切片是显微镜下观察正常细胞组织形态结构、判断细胞组织形态变化的主要
材料。细胞组织离开机体后酶失活，细胞快速自溶，组织形态和结构遭破坏。通过石蜡切片
制作技术可以对组织进行固定处理，保持其原有结构。石蜡切片制片是组织学常规制片技
术中较为广泛应用的方法。常规步骤包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、粘片、烘
片、染色及封片。其中固定、脱水、浸蜡条件对制片技术影响较大。
[0003]大鼠是一种常用的实验动物，作为实验载体广泛用于生命医学研究的领域，大鼠
睾丸组织的细胞形态观察是评价药理毒理及药效的重要项目，提供完整的睾丸组织切片是
前提和基础。大鼠睾丸组织体积通常比小鼠大，比家兔小，睾丸组织水分含量不同，曲细精
管排列紧密，细胞层次较多，纤维组织成分和间质细胞数量较少，所以采用常