2016103480438琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN106000364B
(45)授权公告日2019.05.14
(21)申请号201610348043.8B01J39/18(2017.01)
(22)申请日2016.05.24B01J39/26(2006.01)
B01D15/36(2006.01)
(65)同一申请的已公布的文献号B01D15/32(2006.01)
申请公布号CN106000364A
(56)对比文件
(43)申请公布日2016.10.12CN101146609A,2008.03.19,
(73)专利权人天津大学CN103959057A,2014.07.30,
地址300072天津市南开区卫津路92号天CN103586009A,2014.02.19,
津大学YanqingAnetal..Preparationand
(72)发明人孙彦赵洋洋余林玲董晓燕self-assemblyofcarboxylicacid-
functionalizedsilica《.JournalofColloid
(74)专利代理机构天津市北洋有限责任专利代andInterfaceScience》.2007,第311卷
理事务所12201
代理人王丽审查员杨帆

(51)Int.Cl.
B01J20/286(2006.01)
B01J20/30(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页
(54)发明名称
琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备
方法与应用
(57)摘要
本发明涉及一种琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺
接枝介质及制备方法与应用。琥珀酸酐修饰聚乙
烯亚胺接枝介质；其色谱介质是平均粒径50-170
μm的琼脂糖凝胶颗粒，表面通过环氧基间隔臂
引入聚乙烯亚胺接枝链，然后通过聚乙烯亚胺接
枝链上的氨基与琥珀酸酐相结合，得到羧基离子
交换容量为150-970mmol/L的琥珀酸酐修饰聚乙
烯亚胺接枝介质。本发明的琥珀酸酐修饰量的聚
乙烯亚胺接枝介质或对蛋白质具有较高的吸附
速率或对蛋白质具有很强的吸附特性，表现出了
较高的静态吸附容量，且对盐浓度有较好的耐受
性。介质清洗、除菌方便，易于再生，生物相容性
好，制备方法简单、价格低廉，在蛋白质的分离纯
化中将有广阔的应用前景。
CN106000364B
CN106000364B权利要求书1/1页

1.一种琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝阳离子交换色谱介质；其特征是色谱介质是平均
粒径50-170μm的琼脂糖凝胶颗粒，表面通过环氧基间隔臂引入聚乙烯亚胺接枝链，然后通
过聚乙烯亚胺接枝链上的氨基与琥珀酸酐相结合，得到羧基离子交换容量为150-570mmol/
L的琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝阳离子交换色谱介质；其具体制备方法如下：
1)通过环氧基间隔臂在琼脂糖凝胶表面引入聚乙烯亚胺接枝链，然后将离子交换容量
为740mmol/L的聚乙烯亚胺接枝介质利用N,N-二甲基甲酰胺浸泡，直至将孔内溶剂完全替
换为N,N-二甲基甲酰胺；
2)将步骤1)得到的介质加入到N,N-二甲基甲酰胺中，制备介质悬浮液，N,N-二甲基甲
酰胺体积用量为介质体积量的4倍；
3)向步骤2)得到的介质悬浮液中加入琥珀酸酐，琥珀酸酐用量为0.0222-0.111g/g介
质；混合均匀后置于室温水浴过夜；然后依次用N,N-二甲基甲酰胺，乙醇和水冲洗介质，制
得琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝阳离子交换色谱介质。
2.如权利要求1所述一种琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝阳离子交换色谱介质，其特征
是所述室温过夜条件为：25℃的恒温水浴，170rpm反应24h。

2
CN106000364B说明书1/5页

琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用

技术领域
[0001]本发明涉及一种琥珀酸酐修饰聚乙烯亚胺接枝介质及制备方法与应用，属于生物
技术领域中的蛋白质色谱分离技术。

背景技术
[0002]基因工程和重组DNA技术的发展促进了对重组或天然蛋白以及生物大分子如质粒
DNA和病毒样颗粒的需求。对于生物制药行业来说，核心问题就是向一个高要求和规范化的
市场提供这些新的治疗产品。虽然这些生物大分子的上游加工过程在产品产量方面取得了
明显的进步，但下游的生物加工和纯化过程依然制约着生物大分子的生产，需要加以简化
并降低生产成本。色谱技术尤其是离子交换色谱，因其分离精度高，设备简单，操作方便，广
泛用于生物大分子下游加工过程中。
[0003]目前接枝型介质以其在高流速下仍具有高动态结合容量的特性而受到广泛关注，
成为近年来研究的热点。相较于传统的非接枝介质，接枝层的存在，能够使蛋白的吸附从二
维表面扩展到三维空间，提升了介质的静态吸附容量。同时接枝层内部存在的静电耦合，链
传递等传质机理能够极大的提高蛋