2017113046685一种高密度发酵生产丙酸杆菌细菌素的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN107988288B
(45)授权公告日2020.05.19
(21)申请号201711304668.5CN104560799A,2015.04.29,
(22)申请日2017.12.11孙帅等.丙酸杆菌代谢物摇瓶补料分批发酵
条件研究《.西北农林科技大学学报（自然科学
(65)同一申请的已公布的文献号版）》.2011,第39卷(第7期),第135-138页.
申请公布号CN107988288AF.Y.Ekinci等.Fed-batchenhancement
(43)申请公布日2018.05.04ofjenseniinG,abacteriocinproducedby
(73)专利权人常熟理工学院Propionibacteriumthoenii(jensenii)
地址215500江苏省苏州市常熟市南三环P126《.FoodMicrobiology》.2005,第23卷第
路99号325-330页.
陈玉梅等.乳酸钠和葡萄糖对薛氏丙酸杆菌
(72)发明人郑丽雪王立梅齐斌王家皓生长及代谢物抑菌活性的影响《.西北农林科技
徐田甜大学学报（自然科学版）》.2007,第35卷(第2期),
(74)专利代理机构江苏圣典律师事务所32237第178-182页.
代理人朱林马霞等.酒糟浸出液发酵产细菌纤维素工艺
(51)Int.Cl.优化《.农业工程报》.2015,第31卷(第8期),第
C12P21/00(2006.01)302-305页.
C12N1/20(2006.01)郑丽雪等.不同培养基对丙酸杆菌生长及代
C12R1/01(2006.01)谢物抑菌特性的影响《.食品研究与开发》.2016,
第37卷(第18期),第166-169页.
(56)对比文件
CN101445820A,2009.06.03,审查员杨啸天
权利要求书1页说明书6页附图2页
(54)发明名称4；本发明分批补料保证了高密度、高产率和高浓
一种高密度发酵生产丙酸杆菌细菌素的方度培养丙酸杆菌的实现。
法
(57)摘要
本发明公开了一种高密度发酵生产丙酸杆
菌细菌素的方法，其包括以下步骤：1)种子培养；
2)扩大培养；3)将上述步骤(2)中扩大培养好的
种子液按10％接种量接种至装有2LSLB培养基
的5L发酵罐中，发酵温度为30℃、摇床转速

100rpm下摇床发酵，发酵期间通入CO2使罐压保
持0.05Mpa，控制pH为6.0，从发酵第96小时开始，
每隔24小时分别补加碳源和氮源，连续补充5次，
每次碳源、氮源分别补料100mL；碳源为75％乳酸
钠和25％葡萄糖的混合碳源，碳源的添加浓度为
2g/L～4g/L；氮源包括酵母溶液和玉米酒糟清
液，酵母溶液和玉米酒糟清液的体积比为1:10～
CN107988288B
50，玉米酒糟清液的酒糟和蒸馏水的质量比为1:
CN107988288B权利要求书1/1页

1.一种高密度发酵生产丙酸杆菌细菌素的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将PropionibacteriumfreudenreichiiCS1420单菌落接种至改良PYG培养基中活
化，30℃厌氧培养2.5天；
（2）将上述步骤（1）中得到的种子液按照10%接种量接入装有SLB培养基的三角瓶中，在
30℃下厌氧培养2.5天；
（3）将上述步骤（2）中扩大培养好的种子液按10%接种量接种至装有2LSLB培养基的5L

发酵罐中，发酵温度为30℃、摇床转速100rpm下摇床发酵，发酵期间通入CO2使罐压保持
0.05Mpa，控制pH为6.0，从发酵第96小时开始，每隔24小时分别补加碳源和氮源，连续补充5
次，每次碳源、氮源分别补料100mL；
所述碳源为75%乳酸钠和25%葡萄糖的混合碳源，所述碳源的添加浓度为2g/L～4g/L；
所述氮源包括酵母溶液和玉米酒糟清液，所述酵母溶液和玉米酒糟清液的体积比为1:
10～50，所述玉米酒糟清液的酒糟和蒸馏水的质量比为1:4。
2.根据权利要求1所述的一种高密度发酵生产丙酸杆菌细菌素的方法，其特征在于：所
述碳源的添加浓度为2.5g/L。
3.根据权利要求1所述的一种高密度发酵生产丙酸杆菌细菌素的方法，其特征在于：所
述酵母溶液和玉米酒糟清液的体积比为1:30。

2
CN107988288B说明书1/6页

一种高密度发酵生产丙酸杆菌细菌素的方法

技术领域
[0001]本发明涉及一种丙酸杆菌细菌素的生产方法，具体是一种高密度发酵生产丙酸杆
菌细菌素的方法。

背景技术
[0002]随着人们对食品安全问题的关注度日益增强，天然防腐剂的开发应用受到广泛的
重视。其中，天然防腐剂中的微生物源防腐剂乳酸链球菌素(Nisin)早在1969