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2018115015046 一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵敏度的靶基因,引物对,试剂盒和检测方法.pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN109486976B
(45)授权公告日2022.02.08
(21)申请号201811501504.6novelsporewallprotein(SWP26)from
(22)申请日2018.12.10microsporidiaNosemabombycis《.IntJ
Parasitol》.2008,
(65)同一申请的已公布的文献号Genbank.NosemabombycisSWP26gene,
申请公布号CN109486976Acompletecds;GenBank:EU677842.1《.NCBI》
(43)申请公布日2019.03.19.2009,
(73)专利权人浙江省农业科学院Genbank.Enterocytozoonhepatopenaei
地址310021浙江省杭州市石桥路198号sporewallprotein1(SWP1)mRNA,
completecds;GenBank:MG015710.1《.NCBI》
(72)发明人沈卫锋牛宝龙翁宏飚杨颖.2018,
(74)专利代理机构杭州恒翌专利代理事务所Genbank.Enterocytozoonhepatopenaei
(特殊普通合伙)33298sporewallprotein26(SWP26)mRNA,
代理人王从友completecds;GenBank:MN604022.1《.NCBI》
(51)Int.Cl..2020,
C12Q1/6893(2018.01)沈卫锋等.虾肝肠胞虫(Enterocytozoon
C12Q1/686(2018.01)hepatopenaei)SWP2基因的克隆、表达及其在虾
C12N15/11(2006.01)类病害检测中的应用《.浙江农业学报》.2021,
C12R1/90(2006.01)审查员朱琳

(56)对比文件权利要求书1页说明书4页
YanhongLi,etal.Identificationofa序列表2页附图2页
(54)发明名称之间存在明确的对应关系,适合用作PCR方法进
一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵敏度的靶行对虾肝肠微孢子虫的检测引物。
基因、引物对、试剂盒和检测方法
(57)摘要
本发本发明属于农业和动物检疫技术领域,
具体涉及一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵敏度
的靶基因、引物对、试剂盒和检测方法。一种用于
对虾肝肠微孢子虫病高灵敏度检测的靶基因;该
靶基因的序列如SEQIDNO:1所示。本发明还提
供了一种用于检测上述的序列如SEQIDNO:1所
示靶基因的引物对。本发明还提供了一种对虾肝
肠微孢子虫病的高灵敏度检测方法,该方法包括
步骤:1)从待检对虾中提取总DNA;2)以步骤1)所
得DNA为模板采用所述的引物对进行PCR扩增;3)
用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测步骤2)所得PCR产
物,如产生目标条带,则证明该对虾感染了肝肠
微胞子虫。本发明基于EHP的一种孢壁蛋白基因
CN109486976B
(SWP)设计引物,该引物的特异性强,与病原EHP
CN109486976B权利要求书1/1页

1.一种用于对虾肝肠微孢子虫病高灵敏度检测的靶基因,该靶基因的序列如SEQID
NO:1所示。
2.一种用于检测权利要求1所述的靶基因的引物对,其序列如SEQIDNO:2和SEQID
NO:3所示。
3.一种包含权利要求2所述引物对的试剂盒。
4.一种权利要求2所述的引物对扩增的PCR产物,其序列如SEQIDNO:4所示。
5.根据权利要求1~4任意一项权利要求所述的靶基因、引物对、试剂盒或PCR产物用于
制备虾肝肠微孢子虫病高灵敏度检测产品中的应用。


2
CN109486976B说明书1/4页

一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵敏度的靶基因、引物对、试剂
盒和检测方法

技术领域
[0001]本发明属于农业和动物检疫技术领域,具体涉及一种对虾肝肠微孢子虫病的高灵
敏度的靶基因、引物对、试剂盒和检测方法。

背景技术
[0002]微孢子虫(microsporidia)是一种单细胞的真核内寄生虫,广泛寄生于虾、甲壳类
等动物。对虾肝肠微孢子虫(Enterocytozoonhepatopenaei,EHP)是微孢子虫的一种,属
于微孢子虫科、肠胞虫属,最早于2009年在泰国养殖的斑节对虾(Penaeusmonodon)中发
现,随后在亚洲各国的凡纳滨对虾、脊尾白虾和中国对虾养殖区陆续有EHP检出。研究表明
EHP的感染途径较广,可通过污染的养殖水体和病虾进行水平传播,也可以通过受精卵和虾
苗进行垂直传播。EHP感染的对虾初期没有明显症状,但随着病程的发展体色、胃、肠均明显
异常,体色发白、肠道吸收功能下降,严重的出现肝胰腺萎
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