2019107888577 牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN110607282B
(45)授权公告日2021.05.25
(21)申请号201910788857.7(74)专利代理机构北京科龙寰宇知识产权代理
(22)申请日2019.08.26有限责任公司11139
代理人马鑫
(65)同一申请的已公布的文献号
申请公布号CN110607282A(51)Int.Cl.
C12N5/20(2006.01)
(43)申请公布日2019.12.24C07K16/08(2006.01)
(83)生物保藏信息G01N33/569(2006.01)
CGMCCNO.183012019.07.17G01N33/577(2006.01)
(73)专利权人东北农业大学审查员周钰芳

地址150030黑龙江省哈尔滨市香坊区木
材街59号
(72)发明人乔薪瑗王丽崔文姜艳平
唐丽杰徐义刚李一经周晗
李振雪

权利要求书1页说明书18页附图7页
(54)发明名称
牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小
病毒感染中的应用
(57)摘要
本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体
及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单
克隆抗体由保藏编号为CGMCCNO.18301的杂交
瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检
测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并
建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证
明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好
的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和
夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。
通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方
法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小
病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染
和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛
细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种
可靠的方法。
CN110607282B
CN110607282B权利要求书1/1页

1.分泌牛细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述的杂交瘤细胞株命
名为4E3，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC
NO.18301。
2.由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌产生的牛细小病毒单克隆抗体。
3.权利要求2所述的牛细小病毒单克隆抗体在制备检测牛细小病毒感染试剂中的用
途。
4.一种用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒
中含有权利要求2所述的牛细小病毒单克隆抗体。
5.如权利要求4所述的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中还包括牛
细小病毒细胞培养物或牛细小病毒VP2蛋白包被的酶标板、HPR标记的山羊抗鼠二抗、洗涤
液、封闭液、抗体稀释液、显色液以及终止液。
6.如权利要求5所述的间接竞争ELISA试剂盒，其特征在于，所述的洗涤液为PBST缓冲
溶液，所述的封闭液为5%w/v脱脂乳溶液，所述的抗体稀释液为0.5%w/vBSA溶液，所述的显

色液为TMB底物显色液，所述的终止液为2mo1/L浓H2SO4溶液。

2
CN110607282B说明书1/18页

牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用

技术领域
[0001]本发明涉及一株单克隆抗体及其应用，特别涉及一株牛细小病毒单克隆抗体及其
在检测牛细小病毒感染中的应用。本发明属于医药技术领域。

背景技术
[0002]牛细小病毒感染(Bovineparvovirusinfection)是由牛细小病毒(Bovine
parvovirus,BPV)引起的一种接触性传染病。感染后的主要症状是急性肠胃炎，回肠和空肠
粘膜出现不同程度的充血、出血或溃疡，严重者排出血便；怀孕母牛感染BPV后表现为生殖
机能障碍、流产，严重可引起死胎；犊牛感染BPV后表现为呼吸道和消化道病症牛细小病毒
感染后常表现为隐性感染，不易被发现，影响畜牧业的健康发展。因此，建立有效的检测方
法具有重要的实践意义。
[0003]目前，牛细小病毒感染的检测方法主要包括病毒分离、血清学诊断、电镜检查和分
子生物学检测等。病毒分离是传统的检测方法，鉴定结果准确，但检测周期较长。电镜检查
法是一种特异强、灵敏度高的方法，包括直接电镜检查和免疫电镜检查，均可用于检测BPV，
但对病毒数量有要求，且需要专业仪器设备和人员进行操作。血清学检测方法是BPV流行病
学调查、动物疾病预防和进出口检验检疫中常用的方法。主要包括血凝和血凝抑制试验、血
清中和试验、间接免疫荧光试验(IFA)、病毒中和试验(VNT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。
血凝和血凝抑制试验具有操作简便、快速，不需要特殊设备等优点，但该方法的特异性不
强、灵敏度低，且待检样品需要进行特殊处