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竹蝗和雏蝗部分种类酯酶同工酶的等电聚焦电泳研究
摘要
本文主要研究了竹蝗和雏蝗部分种类酯酶同工酶的等电聚焦电泳研究。通过对竹蝗和雏蝗酯酶同工酶的电泳分离和鉴定，得出了竹蝗和雏蝗酯酶同工酶在等电点和电泳迁移率上存在明显的差异，从而说明它们之间在酶基因和蛋白质结构中存在着一定的差异。本研究结果不仅对揭示竹蝗和雏蝗的遗传多样性和进一步研究其生物学特性具有重要意义，同时也为开展在竹蝗和雏蝗种群中的相关基因、蛋白质研究提供了新的参考依据。
关键词：竹蝗；雏蝗；酯酶同工酶；等电聚焦电泳
Abstract
Thepresentstudyinvestigatedtheisozymepatternsofesterasesinsomespeciesofbamboolocustsandhatchlinglocustsusingisoelectricfocusingelectrophoresis.Byseparatingandidentifyingtheisozymesofesterasesinbamboolocustsandhatchlinglocusts,itwasfoundthatthereweresignificantdifferencesinisoelectricpointsandelectrophoreticmobilitybetweenthetwospeciesoflocusts,indicatingthatthereweredifferencesintheenzymegenesandproteinstructuresbetweenthem.Theresultsofthisstudyarenotonlyimportantforrevealingthegeneticdiversityofbamboolocustsandhatchlinglocustsandfurtherstudyingtheirbiologicalcharacteristics,butalsoprovideanewreferenceforthestudyofrelevantgenesandproteinsinbamboolocustsandhatchlinglocustspopulations.
Keywords:bamboolocust;hatchlinglocust;esteraseisozyme;isoelectricfocusingelectrophoresis
一、引言
竹蝗和雏蝗是我国重要的草食性农业害虫之一，它们对农作物造成的危害严重，尤其是在滇西南、贵州等地。这些赤眼蝗科昆虫的猖獗在一定程度上与它们的遗传多样性密切相关。因此，研究竹蝗和雏蝗的遗传多样性，揭示它们的亲缘关系和物种特性是非常重要的。
酯酶是一类催化羧酰酸酯的酶，其催化反应低选择性，能催化多种底物的加水解除酯键。不同物种或不同个体之间的酯酶同工酶存在差异，其可用于研究不同物种或不同个体间的遗传多样性。等电聚焦电泳是一种高分辨率分离和检测各种酶同工酶的分析方法，它可用于分析酶同工酶的等电点和电泳迁移率，从而揭示酶同工酶之间的差异和亲缘关系。
本研究旨在通过等电聚焦电泳分析竹蝗和雏蝗酯酶同工酶的差异，探讨竹蝗和雏蝗的遗传多样性和进一步研究其生物学特性。
二、材料与方法
2.1实验材料
竹蝗和雏蝗标本，三号石蜡，Tris-EDTA-bufferedsaline（TE）溶液，CuSO4·5H2O，NaCl，Tris（pH7.0-8.0），实验室常用试剂等。
2.2实验方法
（1）采集标本：从四川省双流县采集竹蝗和雏蝗标本，清洗后将其切成小块，抽取草箭头后放置冰上储备。
（2）制备酯酶提取液：将竹蝗和雏蝗标本加入三号石蜡中均匀混合，取出后加入50mM的Tris-EDTA-bufferedsaline（TE）溶液中，在腰部冰块上反复打磨15分钟，使样品与溶液均匀混合。离心沉淀物，用NaCl溶液洗涤三次，离心泣去上清液。最后以0.05mol/LTris（pH7.0-8.0）溶解制得酯酶提取液。
（3）等电聚焦电泳：将制备好的酯酶提取液进行等体聚焦电泳分离，电泳电梯大小为16×16cm，载液缓冲溶液为200mMTris-Cl（pH8.3）、25mMEDTA、0.2%TritonX-100等，电流强度为10-20mA/cm。
（4）鉴定酯酶同工酶：将分离好的酯酶同工酶涂在特定溶液中，采用紫外线或酶标仪等方法进行鉴定。
三、结果与分析
通过等电聚焦电泳分离竹蝗和雏蝗的酯酶同工酶，发现竹蝗和雏蝗的酯酶同工酶在等电点和电泳迁移率上存在明显的差异，如图1所示。
图1竹蝗和雏蝗酯酶同工酶的等电聚焦电泳
图1中，“1”、“2”分别表示竹蝗和雏蝗的酯酶同工酶，在等电点和电泳迁移率上存在显著区别。竹蝗的酯酶同工酶等电点为pH5.