中药制剂剖析2.ppt

薄层色谱过程中斑点异常现象的探讨

(一)边缘效应
1．原因，这是因为当展开剂在薄层上运行时，极性较弱的展开剂和挥发较强的展开剂在薄层两边较易挥发，它们在薄层两侧的浓度比在中部的浓度小，因此产生了边缘效应。

2．克服方法
(1)采用单一展开剂以代替混合展开剂。
(2)采用共沸混合展开剂来代替一般混合展开剂。
(3)在展开槽内壁上贴以浸湿了展开剂的滤纸条，或用内容积较小封闭严密的展开槽。
(4)狭的薄层较宽的薄层边缘效应小，采用狭薄层代替宽薄层(二)拖尾现象
1．产生之原因及克服方法
(1)点样量太多，展开剂不能全部负载。
克服方法：寻出合适之点样量后，再进行层析.

(2)展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时，常形成斑点拖尾。
克服方法；在展开剂中加入酸，使解离受到抑制，即可防止斑点拖尾。

(3)展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时，常观察到斑点拖尾。
克服方法：在层析K值在10-3～10-8的碱性化合物时，展开剂应调至碱性(如加入吡啶、二乙胺等)。

(4)吸附剂pH的影响。由于化合物与薄层上的酸、碱成盐而产生拖尾现象。
克服方法：换用pH合适的吸附剂或调整展开剂的pH，如加入酸或碱等。

(5)吸附剂和展开剂中痕迹量的金属离子(如Ca2+、Mg2+等)，使层析后的斑点形成拖尾。特别是被展开的化合物具有-COOH及酚-OH等基团时。
克服方法：采用纯净的酸来洗涤和处理吸附剂。展开剂可用精制的方法来除去金属离子。(三)斑点形成念珠状
1.产生之原因及克服方法
(1)单一的化合物在层析过程中分解成二个或更多的化合物。因为这些化合物是十分相似的，因此Rf值也极相似，以致彼此重叠。
克服方法：设法防止在层析过程中化合物的分解。如控制pH值，防止水解等。

(2)同系物或异构体也因为他们的结构相似而彼此Rf值相近，产生斑点重叠。
克服方法：找出合适的层析方法，如采用“传荷层析”(或称络合层析)，可以按照化合物的不饱和度，双键位置，几何异构等情况，有效地选择结合，从而提供了因其结构的差别在层析板上出现不同的比移值。

(3)络合物的形成。
克服方法：加入8-羟基氮萘或HCN或其它络合剂。(4)被层析的检样中组分太多，以致在一定长度的薄层上排布不开，彼此重叠，形成念珠状。
克服方法：将检样用不同溶剂分段萃取，使成为二个或数个检样：或适当增长薄层板的长度，延长层析距离；或进行双向展开。

(5)点样在原点处形成复斑。有时由于检样浓度太稀，常进行多次点样。这样容易造成每次点样中心不重合，形成具有复斑的原点(念珠状的雏形)，展开后往往形成念珠状。
克服方法：用浓度适宜的检样一次点样。(四)在同一块薄层上出现比移值大小悬殊的斑点
1.产生原因由于检样中含有极性大小相差悬殊的组份。
2.克服方法
(1)将检样用不同极性的溶剂萃取，使分为两个检样分别进行层析。
(2)可将薄层划成前景与后景两个部份分别处理。即先选用极性大的展开剂将前景展至前沿，使后景均匀展开。然后再用极性小的展开剂，使后景留在原点，使前景均匀展开。

(五)比移值不稳定
1.产生原因及克服方法
(1)展层时温度不恒定。温度影响Rf值。温度直接影响分配系数，而且影响展开剂中各溶剂的组成比例。温度还影响被层析物质的溶解度。
克服方法：层析时控制恒定温度，以0.5℃左右为宜。(2)层析时间不恒定。
克服方法：在同一块薄板上，同一层析槽内，展至恒定的时间，立即取出。

(3)吸附剂规格不统一。
克服方法：使用同产地的吸附剂，并最好使用同一批号之产品，必要时，将各瓶均匀混合后再使用。

(4)展开剂的规格批号不一致。
克服方法：如出现斑点比移值不稳定的情况，并怀疑与展开剂有关时，必需亲自考查处理，如进行试剂中的水份含量测定等。

(5)所用之展开剂往往为多组分的混合展开剂、如配制后立即使用，常因相平衡的时间较短；或某些化学反应(如醇化等)尚未彻底进行，以致混合展开剂之组成尚未稳定，而导致斑点比移值不稳定。
克服方法：展开剂在配制后，应在层析温度下放置三天后方可使用。(6)展开槽之规格不一致。
克服方法：应使用同一规格的展开槽。

(7)展开剂过多次数的重复使用，也会影响斑点比移值的稳定。
克服方法；新鲜配制的展开剂，最好只使用一次。

(8)其它如展开槽未刷净，未能彻底干燥即加入展开剂，以及展开剂保存不当等原因所引起，均应加以注意。

(六)斑点异形
1．产生的原因及克服方法
产生斑点异形的原因很复杂，主要由于吸附剂的细度、活度不均，薄层板铺陈的厚薄不均等原因，有时在层析进行过程中，挪动展开槽或薄层板。
克服方法：注意上述情况，可以克服斑点异形。一般情况下，硅胶、氧化铝的粒度在200目左右为宜，活度一般在1～Ⅱ级。使用前吸附剂应充分混合。
第三节高效液相色