基因治疗_.ppt

一、基因治疗的概念基因治疗的类型
目的基因的选择与制备

受体细胞的培养

载体的选择

将目的基因导入靶细胞(导入方法的选择)

转导细胞的筛选和鉴定

基因治疗的安全性监测和疗效评价二、基因治疗的基本程序(一)目的基因的制备(方法)(二)基因导入方式(方法)的选择(三)基因导入的病毒学方法1.逆转录病毒载体逆转录病毒的结构特征如莫洛尼氏鼠白血病病毒（Mo-MLV）基因组结构：逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体的构建(续)如何获得高效转染、高安全性的重组逆转录病毒？重组逆转录病毒：假病毒颗粒的产生并感染靶细胞逆转录病毒载体重组逆转录病毒(核酸部分只能是逆转录病毒载体)2、腺病毒载体(略)2)多态性脂质体(五)靶细胞的选择常用的靶细胞的种类(六)转染细胞的筛选和导入基因的鉴定新霉素抗性选择系统----G418筛选原理2、导入基因的鉴定(七)基因治疗临床试验的审批(略)2.基因置换(基因矫正)3、基因添加4、基因干预(二)基因干预主要有以下几种方法反义核酸(antisensenucleicacid)1、反义RNA技术ODN与mRNA结合后抑制后者的翻译(反义核酸技术)；2、核酶(ribozyme)技术最简单的核酶二级结构——锤头状结构(hammerheadstructure)核酶催化部份和底物部份组成锤头结构人工设计的核酶核酶在基因治疗中的应用RNA干涉(扰)(RNAinterference,RNAi)(补充)RNAINTERFERENCE3、自杀基因技术自杀基因(suicidegene)的功能如下图所示：四、遗传病的基因治疗(一)腺苷脱氨酶(ADA)缺陷病的基因治疗ADA缺陷导致SCID的分子机制2.ADA缺陷病的基因治疗研究3.ADA缺陷的临床基因治疗
ADA-gene+vector（逆转录病毒）

重组分子患者TLyCIL-2刺激C分裂
导入
生长、分裂的细胞
10天
ADAgene表达

回输患儿体内
1~2月治疗一次,10.5个月后
患儿体内ADA水平达正常人的25%
(二)血友病B的基因治疗(略)(三)家族性高胆固醇血症的基因治疗(略)(一)抑制和杀伤肿瘤细胞自杀基因在肿瘤组织中的特异性表达2.抑制癌基因的表达3.恢复抑癌基因的功能