ESI和APCI选择ppt课件.ppt

优化ESI和APCI进行在线LC/MS分析－溶液化学课程在这一部分，你将学习：含杂原子的样品

通过引入可接受一个电荷的化合物

在溶液中是多电荷的样品

在溶液中是离子的化合物
适用于热喷雾的样品
当不能引入电荷时避免极其非极性的样品影响电喷雾离子化的因素电喷雾要求在溶液中预先形成离子正离子检测：
碱性样品（例如，含有精氨酸和/或赖氨酸的多肽）
降低pH 乙酸 pH(3-4)
甲酸 pH(2-3)
三氟乙酸(TFA) pH(1-2)
pH至少低于样品pKa2个单位
负离子检测：
酸性样品（例如，含有天冬氨酸和/或冬氨酸的多肽）
增加pH（氢氧化铵）
pH至少高于样品pKa2个单位
中性样品：阳离子化，电荷交换，APCI（以后讨论）
pH影响－溶菌酶（MW14306）溶液中离子的形成：负离子检测API-MS添加剂使用挥发性离子对试剂正离子ESI模式中的离子对试剂挥发性缓冲液浓度对ES信号的影响缓冲液对ESI信号的影响min不适合的流动相：
甲苯
苯
苯乙烯
烃
CCl4
CS2
环烃对比TFA，使用HOAc的流动注射标准
[M+H]++[CF3COO]- [M+HCF3COO]°
(有利)
与酸根阴离子成强离子对
TFAFix
依据挥发性（蒸馏法）溶液RCOOH（丙酸）代替CF3COOH。
RCOOH柱后添加（例如，20%酸,80%异丙醇，流速0.1mL/min。

[M+H]++[RCOO]- [M+HRCOO]°
(有利) 与丙酸成弱离子对

何时进行工作：
bp弱离子对离子>bp强离子对离子
例如，bp丙酸>bpHFBA>TFA
信号增强（在最后溶液中20%）在IPA中75%丙酸的1:2柱后添加丙酸的柱后添加，改善使用25mMHFBA分离的b-内酰胺的响应电喷雾中的阳离子通过柱后添加对电喷雾产生最佳的化学效果LC溶剂的柱后修正以优化API-MS响应小分子，极性到非极性
含杂原子的样品
适合于离子束的样品（具相当的挥发性）和大部分适合于热喷雾的样品
避免典型的在溶液中带电荷的样品
避免非常热不稳定或光敏的样品关键参数
离子化
气相CI
质子化（例如，H3O+）（碱）
电荷交换
去质子化（酸）
电子捕获（卤素，芳族化合物）
探针温度
较高温度利于去溶剂化和气化样品。
太高温度导致样品分解。
通常：使用高纯水和有机溶剂。在APCI中甲醇是比乙腈好的选择。C挥发性缓冲液浓度对APCI信号的影响流动相条件：8%甲醇在(A)水；(B)0.2%乙酸；(C)50mM磷酸铵；或(D)50mM磷酸钠中Abundance600次盐溶液进样后的APCI喷雾室min600次带有自动转换的进样后的APCI喷雾室在APCI模式中离子对试剂对LC/MS分析的影响灵敏度
如果样品用两种技术都可以离子化，电喷雾通常较灵敏，且背景噪音低。
基质和流动相影响
电喷雾对样品和溶剂基质比APCI更灵敏（例如，信号抑制）
相对于APCI，电喷雾要求较低的挥发性缓冲液浓度
有机溶剂选择极大地影响APCI的离子化
流速
电喷雾在低流速（<100µL/min）工作较好，而APCI不是
在高流速时（>750µL/min），APCI比电喷雾更灵敏，且具有低噪音参考文献