发明公布-2022115470930-一种近红外荧光ADC免疫制剂及其制备方法与应用.pdf

(19)国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN115814111A
(43)申请公布日2023.03.21
(21)申请号202211547093.0A61K47/65(2017.01)
(22)申请日2022.12.05A61P35/00(2006.01)
A61P1/18(2006.01)
(71)申请人复旦大学附属中山医院C07K16/00(2006.01)
地址200032上海市徐汇区医学院路136号C07K1/113(2006.01)
申请人上海徐汇上医中山免疫治疗技术转

化研究中心
(72)发明人杨振霖史逸冰胡嘉禄
(74)专利代理机构上海申汇专利代理有限公司
31001
专利代理师翁若莹
(51)Int.Cl.
A61K49/00(2006.01)
A61K45/00(2006.01)
A61K38/08(2019.01)
A61K47/68(2017.01)
权利要求书2页说明书15页附图14页
(54)发明名称
一种近红外荧光ADC免疫制剂及其制备方法
与应用
(57)摘要
本发明公开了一种近红外荧光ADC免疫制剂
及其制备方法与应用。本发明的ADC免疫制剂为
近红外荧光染料与含羧基的细胞毒性药物和单
域抗体的共价偶联物；所述的近红外荧光染料为
吸收光谱和发射光谱在600‑900nm范围内的多甲
川菁染料。本发明所提供的近红外荧光ADC免疫
制剂是首个基于单域抗体的近红外荧光ADC免疫
制剂，其单域抗体/近红外荧光染料/细胞毒性药
物为1mol/1mol/1mol，其最大吸收在600‑1000nm
区域，最大的发射波长在600‑1700nm区域，具有
较大的摩尔吸光系数，适用于荧光活体成像(近
红外一窗活体成像和近红外二窗活体成像)。
CN115814111A
CN115814111A权利要求书1/2页

1.一种近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，该ADC免疫制剂为近红外荧光染料与含
羧基的细胞毒性药物和单域抗体的共价偶联物；所述的近红外荧光染料为吸收光谱和发射
光谱在600‑900nm范围内的多甲川菁染料，其化学结构式如式I所示：

其中，n1、n2、n3分别独立地选自0、1、2或3；

R1、R2分别独立地选自氢原子、烷基、苯基、烷磺酸基或苯基取代的烷基；R3选自C1‑12的
亚烷基；

X1、X2分别独立地选自S、O、氢原子、烷基、烷磺酸基或苯基取代的烷基；X3选自O、S或Se。

2.如权利要求1所述的近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，所述式I中的n1、n2、n3均

为1，R1、R2均为苯基，R3为亚乙基‑CH2‑CH2‑，X1、X2均为‑CH(CH3)2，X3为S；即所述近红外荧光
染料的具体化学结构式如式II所示：

3.如权利要求1所述的近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，所述的ADC免疫制剂为近
红外荧光染料与含羧基的细胞毒性药物和单域抗体以1:1:1的摩尔比形成的共价偶联物。
4.如权利要求1所述的近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，所述的单域抗体为FR3区
的丝氨酸特异性突变为半胱氨酸的一类单域抗体。
5.如权利要求4所述的近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，所述的单域抗体为抗5T4
抗体。
6.如权利要求5所述的近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，所述的抗5T4抗体为
n501。
7.如权利要求5所述的近红外荧光ADC免疫制剂，其特征在于，所述含羧基的细胞毒性

2
CN115814111A权利要求书2/2页
药物包括耳抑素肽类药物。
8.权利要求1～7中任意一项所述的近红外荧光ADC免疫制剂的制备方法，其特征在于，
包括以下步骤：
1)将单域抗体与还原剂进行反应以还原单域抗体中的二硫键，再加入溶解在有机溶剂
中的近红外荧光染料‑细胞毒性药物偶联物，反应后得到混合物；
2)将步骤1)所得的混合物加入至脱盐柱，除去残余的近红外荧光染料，之后离心收集
上清液，即得到所述的近红外二窗荧光免疫探针。
9.如权利要求8所述的近红外荧光ADC免疫制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1)
中的还原剂为磷酸三(2‑氯乙基)酯、二乙基三胺五乙酸或5，5’‑二硫代双(2‑硝基苯甲酸)
和磷酸三(2‑氯乙基)酯中的至少一种，所述的有机溶剂为N，N‑二甲基甲酰胺、N，N‑二甲基
乙酰胺和二甲基亚砜中的至少一种。
10.如权利要求8所述的近红外荧光ADC免疫制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1)
中的反应条件为：在4‑60℃下振荡反应50‑70min。
11.如权利要求8所述的近红外荧光ADC免疫制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1)
中离心的条件为：温度3‑5℃，时间0.5‑1.5min，转速7000‑12000r/min。
12.权利要求1～7中任意一