发明授权-2013800119781-测定(D)‑2‑羟基戊二酸(D2HG)或(D)‑2‑羟基己二酸的工具和方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN104145022B
(45)授权公告日2017.07.11
(21)申请号201380011978.1专利权人鲁普莱希特-卡尔海德堡大学
(22)申请日2013.03.01(72)发明人J·巴尔斯S·普施
(65)同一申请的已公布的文献号A·冯戴姆灵W·布克尔
申请公布号CN104145022A(74)专利代理机构北京市中咨律师事务所
(43)申请公布日2014.11.1211247
代理人黄革生刘金辉
(30)优先权数据
12157663.12012.03.01EP(51)Int.Cl.
C12Q1/00(2006.01)
(85)PCT国际申请进入国家阶段日
2014.09.01(56)对比文件
SarahE.Carpenter.“Anenzyme-coupled
(86)PCT国际申请的申请数据assayforglyoxylicacid”.《Analytical
PCT/EP2013/0541602013.03.01Biochemistry》.2013,右栏第1段至第
(87)PCT国际申请的公布数据243页左栏第3段.
WO2013/127997EN2013.09.06审查员冯娟
(73)专利权人德国癌症研究中心

地址德国海德堡权利要求书2页说明书25页附图16页
(54)发明名称氢酶，和(v)辅因子。
测定(D)-2-羟基戊二酸(D2HG)或(D)-2-羟
基己二酸的工具和方法
(57)摘要
本发明涉及检测样品中的(D)-2-羟基戊二
酸或(D)-2-羟基己二酸的方法，所述方法包括步
骤为：a)将样品与试剂混合物接触，其中所述试
剂混合物包含:(i)溶剂,(ii)具有氧化态和还原
态的染料,其中还原态可以与氧化态区分并且其
中染料初始以氧化态存在，(iii)电子转移剂，
(iv)(D)-2-羟基戊二酸脱氢酶，和(v)辅因子；和
b)通过测量染料的还原态的生产检测(D)-2-羟
基戊二酸或(D)-2-羟基己二酸。本发明还涉及用
于诊断和/或监控对象中(D)-2-羟基戊二酸相关
的疾病的方法。本发明也涵盖用于诊断对象中的
异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因中或(D)-2-羟基戊二
酸(D2HG)脱氢酶基因中的突变的方法。此外，本
发明提供了试剂盒，所述试剂盒包含(i)溶剂,
(ii)具有氧化态和还原态的染料,其中还原态可
以与氧化态区分并且其中染料初始以氧化态存
CN104145022B
在，(iii)电子转移剂，(iv)(D)-2-羟基戊二酸脱
CN104145022B权利要求书1/2页

1.试剂混合物在制造用于检测样品中的(D)-2-羟基戊二酸或(D)-2-羟基己二酸的方
法的试剂盒中的用途，所述方法包括:
a)将样品与试剂混合物接触，其中所述试剂混合物包含:
(i)溶剂,
(ii)具有氧化态和还原态的染料,其中还原态能够与氧化态区分并且其中染料初始以
氧化态存在,
(iii)电子转移剂,
(iv)(D)-2-羟基戊二酸脱氢酶,和
(v)辅因子；和
b)通过测量染料的还原态的生产检测(D)-2-羟基戊二酸或(D)-2-羟基己二酸。
2.试剂混合物在制造用于诊断和/或监控对象中(D)-2-羟基戊二酸相关的疾病的方法
的试剂盒中的用途,所述方法包括:
a)将所述对象的样品与试剂混合物接触,其中所述试剂混合物包含:
(i)溶剂,
(ii)具有氧化态和还原态的染料,其中还原态能够与氧化态区分并且其中染料初始以
氧化态存在,
(iii)电子转移剂,
(iv)(D)-2-羟基戊二酸脱氢酶,和
(v)辅因子；和
b)通过测量染料的还原态的生产检测(D)-2-羟基戊二酸,从而诊断和/或监控所述对
象中(D)-2-羟基戊二酸相关的疾病。
3.权利要求2的用途，其中所述(D)-2-羟基戊二酸相关疾病是选自由弥散性神经胶质
瘤、急性髓性白血病(AML)、软骨肉瘤、胆管癌和甲状腺癌组成的组的肿瘤性疾病；或其中所
述(D)-2-羟基戊二酸相关的疾病是戊二酸尿症。
4.权利要求3的用途，其中所述弥散性神经胶质瘤是WHOII级星形细胞瘤(AII)、WHO
III级星形细胞瘤(AIII)、WHOII级少突胶质细胞瘤(OII)、WHOIII级少突胶质细胞瘤
(OIII)、WHOII级少突星形细胞瘤(OAII)、WHOIII级少突星形细胞瘤(OAIII)、或继发性成
胶质细胞瘤。
5.试剂混合物在制造用于诊断对象中异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因中或(D)-2-羟基戊二
酸(D2HG)脱氢酶基因中的突变的方法的试剂盒中的用途，所述方法包括:
a)将所述对象的样品与试剂混合物接触，其中所述试剂混合物包含：
(i)溶剂,
(ii)具有氧化态和还原态的染料,其中还原态能够与氧化态