发明授权-2019100773534-维生素D的测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN109696435B
(45)授权公告日2021.03.09
(21)申请号201910077353.4G01N1/28(2006.01)
(22)申请日2019.01.25(56)对比文件
(65)同一申请的已公布的文献号CN105352958A,2016.02.24
申请公布号CN109696435ACN104749266A,2015.07.01
CN109188003A,2019.01.11
(43)申请公布日2019.04.30CN108362688A,2018.08.03
(73)专利权人深圳天辰医疗科技有限公司CN104969067A,2015.10.07
地址518000广东省深圳市坪山区龙田街CN104076155A,2014.10.01
道老坑社区大工业区青松路56号友利CN108872614A,2018.11.23
通科技工业厂区B栋3楼CN108136027A,2018.06.08
(72)发明人田永帅唐灿CN108977437A,2018.12.11
CN1175573A,1998.03.11
(74)专利代理机构深圳市恒程创新知识产权代CN1423627A,2003.06.11
理有限公司44542CN103224560A,2013.07.31
代理人赵爱蓉WO0194415A2,2001.12.13
(51)Int.Cl.审查员任宇琛
G01N21/76(2006.01)

G01N33/543(2006.01)权利要求书1页说明书23页附图6页
(54)发明名称
维生素D的测定方法
(57)摘要
本发明公开一种维生素D的测定方法，包括
如下步骤：a、取解离液于反应杯中，加入血清、血
浆或全血样本；b、转移至孵育盘上反应；c、取步
骤b中反应后的混合物至新的反应管中作为处理
后的样本；d、向步骤c中处理后的样本中加入维
生素D单抗包被的磁珠，反应8min‑15min后进行
磁分离，去上清；e、向步骤d反应管中加入维生素
的AP酶标记物，反应后进行磁分离，去上清；f、加
入底物AMPPD或APS‑5，测试反应的发光值，通过
所述发光值得到维生素D的含量。本方法可以提
高血液中维生素D的测定的精度。
CN109696435B
CN109696435B权利要求书1/1页

1.一种维生素D的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
a、取解离液于反应杯中，加入血清、血浆或全血样本；
b、转移至孵育盘上反应；
c、取步骤b中反应后的混合物至新的反应管中作为处理后的样本；
d、向步骤c中处理后的样本中加入维生素D单抗包被的磁珠，反应8min-15min后进行磁
分离，去上清；
e、向步骤d反应管中加入维生素的AP酶标记物，反应后进行磁分离，去上清；
f、加入底物AMPPD或APS-5，测试反应的发光值，通过所述发光值得到维生素D的含量；
其中，步骤a中的解离液包括如下组分：
磷酸盐缓冲液，其中磷酸盐在所述解离液中的浓度为10mM-50mM；Beta-巯基乙醇
0.1％-2％；异硫氰胍0.1％-2％；EDTA-2Na0.1％-2％；SDS0.1％-2％；Tween-200.1％-
5％。
2.如权利要求1所述的维生素D的测定方法，其特征在于，所述步骤b中，反应时间为
5min～12min。
3.如权利要求2所述的维生素D的测定方法，其特征在于，所述步骤b中，反应时间为
7min～9min。
4.如权利要求2所述的维生素D的测定方法，其特征在于，所述磷酸盐浓度为30mM-
40mM。
5.如权利要求4所述的维生素D的测定方法，其特征在于，Beta-巯基乙醇的含量为
0.5％-1％。
6.如权利要求4或5所述的维生素D的测定方法，其特征在于，异硫氰胍0.5％-1％，所述
EDTA-2Na的含量为0.4％-1.2％。
7.如权利要求6所述的维生素D的测定方法，其特征在于，所述SDS的含量为0.5％-1％。
8.如权利要求7所述的维生素D的测定方法，其特征在于，所述Tween-20的含量为2％-
4％。

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CN109696435B说明书1/23页

维生素D的测定方法

技术领域
[0001]本发明涉及化学发光检测技术领域，特别涉及一种维生素D的测定方法。

背景技术
[0002]在临床实践中，25-羟基-维生素D的血清水平被认为是维生素D状态的主要指标。
[0003]血清中几乎所有循环25(OH)-维生素D是与维生素D结合蛋白(88％)和白蛋白
(12％)结合。维生素D结合蛋白(DBP)是血清浓度250-400mg/L的含量丰富的蛋白。维生素D
以接近抗体合力的相对高亲合力(5*108M-1)与DBP结合血清中维生素D浓度的精确测